1 2×SYBR Green qPCR Mix 5 x 1ml 2 50×ROX Reference Dye 1ml 保存条件: 置于-20℃避光保存,一年有效,2～8℃条件下储存6个月,避免反复多次冻融。 使用说明: 一、配制 Real-Time PCR反应体系: 1、将所有试剂2×SYBR Green qPCR Mix,ROX Reference Dye,模板,引物和RNase-Free ddH2O,在室温下融解并...
SYBR Green I 的实际名称是二(4-羟基苯基)-6(4-甲氧基苯基)-三甲基吡啶三乙酸铵,由Invitrogen推出的一种新型定量荧光染料。在定量PCR中,SYBR Green I可与双链DNA(dsDNA)非特异性结合后发出荧光,进而通过检测反应体系中的SYBR Green I 荧光强度,达到检测PCR产物扩增量的目的。游离状态下,SYBR Green I发出微弱的...
qPCR染料法的原理 qPCR染料法在体系中额外加入了非特异性双链DNA荧光染料(通常为SYBR Green I),游离的荧光染料本身不发光或只发出极弱的荧光信号,但染料可以非特异地结合在双链DNA小沟上,并发出较强的荧光信号。随着PCR循环数的增加,越来越多的染料与双链DNA结合,产生的荧光量与双链DNA含量成正比。因此可以通过检...
QPCR 条件的优化对于制定稳健的检测方案非常重要。优化不佳的表现是重复样本之间缺乏再现性,以及检测低效且不灵敏。两种主要优化方法是优化引物浓度和/或退火温度。 使用SYBR Green I 染料检测一个或多个稳定内参基因的靶量是qPCR的常见应用。下面是一个可以适应特定实验需要的标准实验方案。 如果您对实验内容感兴趣,可...
SYBR Green I是一种嵌合荧光染料，在qPCR反应中，SYBR Green I与双链DNA结合并发出荧光，荧光信号的强度与DNA的量成正比。因此，DNA聚合酶的高效性和特异性对于qPCR结果的准确性至关重要。HCY™ HotStart SYBR Green qPCR Master Mix的优势HCY HotStart SYBR Green qPCR Master Mix (2×) 是一款专为实时荧光...
从上述原理中可以看出,与常规的PCR体系相比,SYBR染料法荧光定量PCR的体系最大的区别就是额外添加了荧光染料SYBR Green I,使得体系中的双链DNA量跟荧光强度呈正相关。 3、SYBR Green I 染料法的优点 ♦ 通用性 由于SYBR Green I 染料结合dsDNA的非选择性,因此染料法的通用性强,无论要检测什么基因,除了基因对应...
qPCR小课堂之SY..qPCR染料法的原理qPCR染料法在体系中额外加入了非特异性双链DNA荧光染料(通常为SYBR Green I),游离的荧光染料本身不发光或只发出极弱的荧光信号,但染料可以非特异地结合在双链DNA小沟
qPCR染料法在体系中额外加入了非特异性双链DNA荧光染料(通常为SYBR Green I),游离的荧光染料本身不发光或只发出极弱的荧光信号,但染料可以非特异地结合在双链DNA小沟上,并发出较强的荧光信号。随着PCR循环数的增加,越来越多的染料与双链DNA结合,产生的荧光量与双链DNA含量成正比。因此可以通过检测qPCR体系中的荧光...
染料法一般使用的是SYBR Green I染料,这是一种可以与双链DNA小沟结合的荧光染料,其不会与单链DNA结合,且在游离状态下几乎无荧光,只有与双链DNA结合才会发出荧光,因此将PCR扩增产生的双链DNA数量与荧光强度直接关联,产生实时监测的效果。 SYBR Green染料法优点 ...
SYBR Green I法是进行定量qpcr实验的常用方法,本文介绍了SYBR Green I法的原理、优缺点,以及进行定量qPCR的常见问题和解决方法。 一.SYBR Green I法原理 1.Sybr Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,在PCR反应体系中,Sybr荧光染料特异性地掺入DNA双链与双链DNA结合后,发射荧光信号,而不掺入双链中的...