一、数据准备与标准化 在进行QPCR数据分析前,首先需要准备好实验数据,包括样本的CT值(循环阈值)和对应的标准曲线数据。为了确保数据的可比性,需要对数据进行标准化处理,即选用一个或多个内参基因进行校正,以消除实验过程中的系统误差。 二、校正处理 1.选择合适的内参基因:内参基因应选择在实验条件下表达稳定、且与...
1、整理qPCR数据如下。Sample为模板名称,595为引物扩增的基因名称,actin为内参。 2、计算ΔCt。ΔCt=基因值-内参值。 3、计算均值。以野生型SY4D表达量为1,只需计算SY4D均值。 4、计算ΔΔCt。ΔΔCt=ΔCt-average。注意average是同一个,函数上加$。 5、计算2^(-ΔΔCt)。 6、计算2^(-ΔΔCt)均值。
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