策略二:直接使用全部(-△△Ct)值进行计算。 可以看到,两种方法最后结果是一致的。最后需要明确的是:Ct值的范围为15-35时为有效的。Ct值小于15,认为扩增在基线期范围内,未达到荧光阈值。理想情况下,Ct值与模板起始拷贝数的对数存在线性关系,也就是标准曲线。通过标准曲线,扩增效率为100%时,计算出基因单个拷贝数定...
定量数据处理方法的讨论,我们聚焦于△△Ct法这一广泛应用于qPCR数据处理的原理。△△Ct法的关键在于Ct值,它表示荧光信号达到阈值时的循环数,通常在第3-15个循环间设定基线,并据此计算模板起始拷贝数的对数关系。模板的Ct值越小,起始拷贝数越高;反之,Ct值越大,起始拷贝数越低。PCR循环在Ct值对...
策略二:直接使用全部(-△△Ct)值进行计算。 可以看到,两种方法最后结果是一致的。最后需要明确的是:Ct值的范围为15-35时为有效的。Ct值小于15,认为扩增在基线期范围内,未达到荧光阈值。理想情况下,Ct值与模板起始拷贝数的对数存在线性关系,也就是标准曲线。通过标准曲线,扩增效率为100%时,计算出基因单个拷贝数定...
策略二:直接使用全部(-△△Ct)值进行计算。 可以看到,两种方法最后结果是一致的。最后需要明确的是:Ct值的范围为15-35时为有效的。Ct值小于15,认为扩增在基线期范围内,未达到荧光阈值。理想情况下,Ct值与模板起始拷贝数的对数存在线性关系,也就是标准曲线。通过标准曲线,扩增效率为100%时,计算出基因单个拷贝数定...