2、Q-PCR QuantiFast SYBR Green PCR Kit为两步循环方案,分别为95℃的变性阶段和60℃的联合退火/延伸阶段。该方案对Tm值在60℃以下的引物有效。为了使SYBR Green发挥高效作用,目的序列应当在60-200bp之间。该PCR过程必须以95℃作为第一步的起始孵育反应,以活化HotStar Taq Plus DNA Polymerase.对于96孔板,我们建...
q-PCR实验原理、过程、数据处理及应用.docx,q-PCR(Quantization Polymerase Chain Reaction)聚合酶链式反应 一、名称辨析 PCR 即常规的聚合酶链式反应。以DNA为模板,体外高温条件(95℃)使其解聚成单链;随后于低温状态(60℃)实现单链NA与引物的互补配对;之后在DNA聚
斜率:由荧光定量PCR反应的数学原理可知,通过绘制标准曲线可评估PCR反应的扩增效率。为了正确地评估PCR扩增效率,至少需要做3次平行重复,并至少做5个数量级倍数连续梯度稀释模板浓度。得到的扩增效率在90-110%之间时,认为此扩增接近理想情况,数据可以用来计算。此时标准曲线的斜率应为-3...
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1.师姐,你好,我想问一下什么样的pcr数据才是可信的呢?是一次每个组别跑3个个体以上,一次结果假设就是我要的趋势,我还需要接着重复实验吗,2.还有就是我想问一下细胞和组织都是这种算法吗?3.pcr实验要求所有小鼠需要向wb一样内参表达是齐的吗?4.我用对照组的目标-内参后每个个体结果差别比较大,那请问还可以...
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