DNA pull-down技术是一种研究体外DNA与蛋白互作的有效方法。与pull-down不同的是，这项技术是以特定DNA序列作为探针，研究或寻找与之相结合的蛋白，常应用于检测鉴定转录因子或组蛋白等。通常将DNA探针与生物素偶联，生物素与链霉亲和素间以高强度的非共价结合，可将DNA探针固定，以便捕获互作蛋白。DNA pull
一、技术原理：基于亲和力的分子捕获 Pull-down实验的核心是利用特异性结合将目标蛋白从混合物中分离，并富集其相互作用蛋白，具体流程如下：1.固定化诱饵蛋白 抗体-抗原系统：将特异性抗体偶联到固相载体（如琼脂糖珠、磁珠），捕获细胞裂解液中的抗原蛋白。标签蛋白系统：在目标蛋白上融合表达亲和标签（如His标签、GST...
为了使pull-down技术更高效且易于应用,研究人员将待捕获的目的蛋白与特定的蛋白标签融合表达,而诱饵蛋白则可以与标签结合,进而捕获目的蛋白,目前pull-down中应用最为广泛的融合标签是GST(glutathione-S-transferase,谷胱甘肽-S-转移酶),此外6×His标签等也可以。为了方便后续检测鉴定,待捕获蛋白也可以融合Flag、HA或Myc...
一、技术概述 GST Pull-down技术是一种基于谷胱甘肽转移酶(GST)标签的蛋白互作研究方法,通过将目标蛋白(诱饵蛋白)与GST标签融合表达,利用谷胱甘肽(GSH)磁珠特异性结合GST标签的特性,捕获与诱饵蛋白相互作用的蛋白(捕获蛋白)。 二、实验目的 本实验结合银染或Western Blot检测,可高效鉴定蛋白-蛋白、蛋白-核酸等相互作用,...
小分子药物(Small Molecule SM)Pull-down技术是化学蛋白质组学用于小分子靶点发现、创新药物先导化合物筛选等研究的先进技术,钟鼎生物结合了小分子SM Pull down、MST(超链)、结合复合物质谱解析三大技术平台,为您解决化学蛋白组学问题。
Pulldown技术是一种用于分离和纯化特定蛋白质的技术，通过将目标蛋白质与特定的抗体结合，再利用生物化学方法将抗体与目标蛋白质一起从混合物中分离出来。原理 基于抗原-抗体反应的特异性，通过抗体与目标蛋白质的结合，利用各种生物化学方法将抗体与目标蛋白质一起从混合物中分离出来，从而达到纯化目标蛋白质的目的。历...
Pull-down技术是通过将靶蛋白亲和固定于某种基质上作为“诱饵蛋白”，当细胞抽提液与该基质接触时，与靶蛋白相互作用的配体蛋白被吸附，其他无相互作用的蛋白质则随洗脱液流出。被吸附的配体蛋白则可通过改变洗脱液或洗脱条件从基质上洗脱下来，进行纯化富集即可用于质谱检测。因此，通过Pull-down技术可以确定靶蛋白和互作...
Pull down实验，又称拉下实验，是一种体外亲和纯化技术，蛋白Pull down技术可以提供一种诱饵蛋白来特异性识别配体蛋白质，以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的，是体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力工具。蛋白质Pull down将被亲和试剂标签（如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素）标记的诱饵蛋白固定在某种...
小分子化合物pull down实验技术介绍 一、技术概述 小分子化合物Pull-down实验是一种基于亲和层析的分子互作研究技术，通过将小分子化合物共价偶联至固相载体（如磁珠、琼脂糖微球），从复杂生物样本（如细胞裂解液、组织提取物）中特异性捕获与其结合的靶蛋白，结合质谱（MS）或Western Blot（WB）进行鉴定与分析。该...
基于GST融合蛋白发展起来的pull-down技术称为GST pull-down,这得益于Smith团队在1988年从细菌中纯化出GST融合蛋白,之后逐渐发展为如今研究蛋白互作最常用到的方法之一。GST可以与GSH(谷胱甘肽)结合。GST pull-down的基本原理是将GST融合蛋白作为诱饵蛋白,可与固定在固相支持物上的GSH结合,当把目的蛋白样品经过时,即可得...