DNA pull-down技术是一种研究体外DNA与蛋白互作的有效方法。与pull-down不同的是，这项技术是以特定DNA序列作为探针，研究或寻找与之相结合的蛋白，常应用于检测鉴定转录因子或组蛋白等。通常将DNA探针与生物素偶联，生物素与链霉亲和素间以高强度的非共价结合，可将DNA探针固定，以便捕获互作蛋白。DNA pull-down一...
为了使pull-down技术更高效且易于应用,研究人员将待捕获的目的蛋白与特定的蛋白标签融合表达,而诱饵蛋白则可以与标签结合,进而捕获目的蛋白,目前pull-down中应用最为广泛的融合标签是GST(glutathione-S-transferase,谷胱甘肽-S-转移酶),此外6×His标签等也可以。为了方便后续检测鉴定,待捕获蛋白也可以融合Flag、HA或Myc...
Pull-down技术是通过将靶蛋白亲和固定于某种基质上作为“诱饵蛋白”，当细胞抽提液与该基质接触时，与靶蛋白相互作用的配体蛋白被吸附，其他无相互作用的蛋白质则随洗脱液流出。被吸附的配体蛋白则可通过改变洗脱液或洗脱条件从基质上洗脱下来，进行纯化富集即可用于质谱检测。因此，通过Pull-down技术可以确定靶蛋白和互作...
为了使pull-down技术更高效且易于应用,研究人员将待捕获的目的蛋白与特定的蛋白标签融合表达,而诱饵蛋白则可以与标签结合,进而捕获目的蛋白,目前pull-down中应用最为广泛的融合标签是GST(glutathione-S-transferase,谷胱甘肽-S-转移酶),此外6×His标签等也可以。为了方便后续检测鉴定,待捕获蛋白也可以融合Flag、HA或Myc...
基于GST融合蛋白发展起来的pull-down技术称为GST pull-down,这得益于Smith团队在1988年从细菌中纯化出GST融合蛋白,之后逐渐发展为如今研究蛋白互作最常用到的方法之一。GST可以与GSH(谷胱甘肽)结合。GST pull-down的基本原理是将GST融合蛋白作为诱饵蛋白,可与固定在固相支持物上的GSH结合,当把目的蛋白样品经过时,即可得...
Pull-down 技术又称蛋白质体外结合实验(Binding assay in vitro), 是一种行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,蛋白互作分析Pull-down可用于初步研究两种蛋白质的相互作用分析。 Pull-down技术是通过将靶蛋白亲和固定于某种基质上作为“诱饵蛋白”,当细胞抽提液与该基质接触时,与靶蛋白相互作用的配体蛋白被...
Pulldown技术是一种用于分离和纯化特定蛋白质的技术，通过将目标蛋白质与特定的抗体结合，再利用生物化学方法将抗体与目标蛋白质一起从混合物中分离出来。原理 基于抗原-抗体反应的特异性，通过抗体与目标蛋白质的结合，利用各种生物化学方法将抗体与目标蛋白质一起从混合物中分离出来，从而达到纯化目标蛋白质的目的。历...
Pull down实验，又称拉下实验，是一种体外亲和纯化技术，蛋白Pull down技术可以提供一种诱饵蛋白来特异性识别配体蛋白质，以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的，是体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力工具。蛋白质Pull down将被亲和试剂标签（如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素）标记的诱饵蛋白固定在某种...
pull-down是一种在电子电路中用于保持信号低电平的技术。它通过将电路连接到地(或低电压)来拉低信号电平。 在一个简单的电路中,可以通过将一个电阻连接到地来实现pull-down。当信号线没有任何输入时,电阻将提供一个路径,将电流引导到地,从而保持信号为低电平。 在数字电路中,可以使用一个电阻来连接信号线到地,...
1. 探针制备：活性小分子标记以及标记后的小分子活性鉴定。2. 探针固定：探针分子固定在固相支持物上，...