实验结果 实验组GST-pull down第三列的实验结果可以看出KU-HIS,GST的条带中只检测到了GST,说明KU-HIS没有连接到亲和纯化柱上而被洗脱掉了。而在第四列的实验结果可以分别检测到GST与HIS 标签说明KU与TOP6发生了相互作用使得在条带中分别检测到了GST与HIS标签。
让我们一步步解读Pull Down技术的实验结果吧!1️⃣ WB预实验验证抗体质量 🧐 例如:图1展示了WB预实验的结果,可以看出抗体质量棒棒的,可以进行下一步的WB正式实验啦!2️⃣ 银染结果揭秘 🤩 例如:图2揭示了银染的神秘面纱,目的探针组有差异蛋白被拉出,这意味着我们可以进行后续的质谱分析,探索更多未知哦...
【文献阅读】| 读图 | RIP、ChIP、CoIP、RNA pull down到底是些啥?| 大分子间相互作用(一) 6585 3 33:22 App RIP试剂盒实验操作步骤 1.6万 62 58:18 App GST pull-down检测技术及应用研究 4324 1 3:00:07 App Pull-down+Co-IP+IP-MS大合集(11.19日下午培训) 6426 6 10:36 App GST pull do...
在生物研究中,GST pull-down实验是一种常用的筛选和鉴定蛋白质间相互作用的技术。通过此项实验,我们可以将目标蛋白质与它可能的互作伙伴隔离,并进行进一步的分析,例如使用质谱技术进行蛋白质质谱鉴定。在解读GST pull-down质谱分析结果时,有几个重要的参数需要关注。一、谱图匹配得分(Spectrum Match Score)谱图...
1.GST pull down实验原理 GST pull down的主要原理是利用DNA重组技术将已知蛋白与GST融合,而融合蛋白通过GST与固化在载体上的GTH(谷胱甘肽)亲和结合。简单来说,我们假定a蛋白和b蛋白可能存在互作,将纯化的融合GST的a蛋白和纯化的b蛋白以及能特异性结合GST的Sephrose 4B beads混合在一起孵育一定时间,然后洗去未结合的...
RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。RNA pull down是使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物...
通过扩大性分析,可以在pull-down实验中发现大量潜在的RNA结合蛋白质或RNA分子。最近,通过定向密集了解并且对全基因组探针进行逐一筛 查配对拉下实验证明神经退行性疾病(如帕金森氏症和肌萎缩侧索硬化)与多个mRNAs具有相同的RNA结合伴侣。 总之,RNA pull-down实验结果分析需要根据检测模块及有关的科学问题,选取不同的方...
pull down 实验的结果通常是通过蛋白质分析技术(如免疫印迹、质谱分析等)得到的。根据实验设计和目的,可以使用不同的方法来分析结果。以下是一些常见的分析方法: 免疫印迹(Western blotting):通过将捕获的蛋白质进行电泳分离,然后使用特异性抗体来检测目标蛋白质及其相互作用伴侣的存在与否。可以通过比较不同样品的带状图...
④GST pull-down 验证与结果分析 GST pull-down实验经过考马斯亮蓝和Western blot检测后即可进行结果分析。 考马斯亮蓝检测:通过考染胶中纯化条带区别于未纯化样品条带的分布情况,可以明显看出纯化后的探针蛋白A,在实验组与对照组中都有分布;下面与蛋白A互作的未知蛋白在实验组中存在,在对照组中不存在。证明实验体...