【文献阅读】| 读图 | RIP、ChIP、CoIP、RNA pull down到底是些啥?| 大分子间相互作用(一) 6585 3 33:22 App RIP试剂盒实验操作步骤 1.6万 62 58:18 App GST pull-down检测技术及应用研究 4324 1 3:00:07 App Pull-down+Co-IP+IP-MS大合集(11.19日下午培训) 6426 6 10:36 App GST pull do...
DNA拉下实验（DNA Pull-down）是体外研究DNA与蛋白互作的有效方法，可以探究DNA与转录调控蛋白质的互作，最常见的应用是验证启动子与转录因子的互作情况。DNA Pull-down原理 将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上，形成磁珠-DNA探针复合体，再与细胞核蛋白孵育，这可以将与DNA结合的蛋白吸附在磁珠上。洗涤去...
下拉实验(pull-down assay)是验证体外蛋白互作的主要方式,也是验证没有成熟抗体的蛋白互作的方式之一。通过体外表达亲和蛋白-GST,将亲和蛋白固化在谷胱甘肽亲和树脂上充当“诱饵蛋白”,将细胞或者组织的总蛋白和此“诱导蛋白”混合孵育后可从中捕获“目标蛋白”,最后通过洗脱的方式将“目标蛋白”洗脱后检测,就可以分析蛋...
RNA与蛋白质的相互作用也是非编码RNA发挥功能的主要作用机制之一,其中,RNA pull down是用于检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间互作的主要实验技术之一,也是近年来研究非编码RNA(如IncRNA、circRNA)与蛋白质相互作用及生物学功能验证的主要手段。 基本原理: RNA Pull-down作为研究RNA与蛋白互作的核心技术,是使用体外转录法标记...
使用Magarose-GSH磁珠进行 GST Pull-down 实验,操作简单、快捷,具有传统方法无可比拟的优势。 二、产品特性 产品名称 Magarose-GSH 货号 PMAG002 磁珠浓度 25%(v/v)in 20%乙醇 配基及密度 20-30 umol GSH/ml磁珠 介质 6%交联磁性琼脂糖 粒径 20-45μm 配体结合 6-10 mg GST融合蛋白/ml磁珠 保存 2~...
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Pull-down蛋白质鉴定的步骤为:体外表达纯化”诱饵蛋白”(通常使用GST、polyHis和靶蛋白的融合蛋白或者生物素标记的靶蛋白);使用固定化亲和配体将诱饵蛋白与固相基质稳定结合;再将诱饵蛋白与待测细胞裂解液或者其他含有目标蛋白的溶液进行孵育,在这一过程中,诱饵蛋白与目标蛋白相互作用并结合在一起,通过清洗除去非特异性...
Pull-Down的概念与Co-IP类似,其目的是研究与已知诱饵蛋白结合的蛋白或配体。Pull-Down旨在证明两种蛋白质之间的相互作用或探索可与目的蛋白结合的未知蛋白或分子。Pull-Down不同于IP或Co-IP之处在于,它不是基于抗体-抗原相互作用,不是免疫反应。诱饵蛋白(或配体),通过非抗体亲和系统固定到固相支持物上,这种固定可以...
拉下实验（Pull-down）的缺点 1、两个非同一定位的蛋白可能因电荷或是强亲和力的原因造成假阳性，需用其他方法再次验证，例如Co-IP等；2、验证互作是在试管中进行的生化反应，不能够完全反映细胞内蛋白真实互作的状态；3、融合表达的GST标签，肽链较长，可能会改变原目的蛋白的原有的折叠结构。实验信息 实验过程中...
小分子药物(Small Molecule SM)Pull-down技术是化学蛋白质组学用于小分子靶点发现、创新药物先导化合物筛选等研究的先进技术,钟鼎生物结合了小分子SM Pull down、MST(超链)、结合复合物质谱解析三大技术平台,为您解决化学蛋白组学问题。