在菌落PCR那一步使用我原始的PCR引物(这对引物正向引物是特异性的,反向引物是通用的),电泳检测条带...
连T载的产物,菌液PCR检测,用通用引物M13跑,退火温度55度。我每次都是这样做的,万无一失……