在流式胞内染色中常用的活化细胞方法就是用一定浓度的PMA和Ionomycin刺激细胞4-6小时,同时加入蛋白转运抑制剂(通常是monensin或brefeldin A)来阻止高尔基体将新分泌蛋白运输到细胞外,从而达到通过流式来检测胞内细胞因子的目的。经常会有老师有这样的疑问:加入PMA和Ionomycin,不会间接影响我的实验样本的胞内因子分泌情况...
Ionomycin常与PKC激活剂PMA联用,刺激免疫细胞活化,同时也加入蛋白转运抑制剂(通常是Monensin或Brefeldin A)阻止高尔基体将新分泌蛋白运输到细胞外,以增强细胞内细胞因子的检测。如果是对分泌蛋白进行免疫检测(例如ELISA、蛋白免疫印迹或多重蛋白检测),则无需使用Monensin或Brefeldin A对细胞进行处理。 PMA和Ionomycin活化免...
三、用PMA/ionomycin/brefeldin A刺激细胞 13.将200μl细胞悬浮液(1×10E6个细胞)吸到96孔圆底板的每个孔中。 要使用的孔数取决于实验设计 14.将板在470×g、4℃下离心5分钟。 15.用连接在真空泵上的针头吸出上清液。(流式中文...
三、用PMA/ionomycin/brefeldin A刺激细胞 13.将200μl细胞悬浮液(1×10E6个细胞)吸到96孔圆底板的每个孔中。 要使用的孔数取决于实验设计 14.将板在470×g、4℃下离心5分钟。 15.用连接在真空泵上的针头吸出上清液。(流式中文网注:这里也可以用枪头小心去上清)。 16.将细胞重悬于含有PMA/ionomycin/bref...
Ionomycin/BFA/Monensin的混合液 (Cocktail),其中BFA和Monensin起破坏高尔基体作用,对细胞具有毒性,因此该刺激方案不能达到最优刺激效果,而我们改进后的方案是先用PMA和 Ionomycin刺激0.5 h,让细胞有一个刺激的反应过程,再加入BFA和Monensin抑制,一定程度上避免了对细胞的毒性,该刺激方案能更有效的刺激细胞产生细胞因子...
PMA+Ionomycin淋巴细胞刺激物 达优/达科为 50T 达优是达科为自主品牌,提供ELISPOT/ELISA实验全套产品,无血清ELISPOT培养基及DC培养基;人与小鼠预包被ELISPOT试剂盒、读板服务;人,小鼠和大鼠的预包被 ELISA试剂盒;人的分离液/管及啮齿类及猪的分离液。医用级分离液(有医疗器械许可证)和分离管,内毒素含量低(小于0.06...
PMA和PHA的功能区别 PMA：佛波醇酯类多克隆刺激剂，是DAG（二酯酰甘油）的analog，脂溶性，自由通过细胞膜，直接作用于细胞活化信息传导通路上的PKC。Ionomycin：钙离子载体，使细胞内Ca 2+浓度增加，激活calcineurin。来自PKC和calcineurin的共同信号最终引起T细胞活化。PHA：植物血凝素类多克隆刺激剂，作用于TCR－CD3...
PMA+Ionomycin淋巴细胞刺激物 达优/达科为 50T 达优是达科为自主品牌,提供ELISPOT/ELISA实验全套产品,无血清ELISPOT培养基及DC培养基;人与小鼠预包被ELISPOT试剂盒、读板服务;人,小鼠和大鼠的预包被 ELISA试剂盒;人的分离液/管及啮齿类及猪的分离液。医用级分离液(有医疗器械许可证)和分离管,内毒素含量低(小于0.06...
流式胞内染色中最常用的活化细胞方法就是用一定浓度的PMA和Ionomycin刺激细胞4-6小时,同时加入蛋白转运抑制剂(通常是monensin或brefeldin A)阻止高尔基体将新分泌蛋白运输到细胞外,从而达到通过流式来检测细胞因子的目的。今天,就来简单的聊一聊PMA和Ionomycin刺激细胞活化的机制。 离子霉素是一种有效且有选择性的钙离...
PMA/Ionomycin Mixture (250×)是佛波酯(Phorbol 12-Myristate 13-Acetate, PMA)和离子霉素(Ionomycin)的混合物。PMA和Ionomycin处理足以诱导很多类型的细胞活化,分泌细胞因子。该混合物可用于刺激体外培养细胞产生细胞因子,随后用免疫学方法进行检测。还可以与蛋白转运抑制剂(BFA/Monensin Mixture (250×) (目录号CS1002...