温和的表达条件运气好的话能稍微让蛋白质没那么容易misfold,不过不要抱太大希望。如果还是表达不出来,...
1 可能是太弱你看不出来,建议用His抗体做个western 看看是不是有条带而看不出。2 是不是融解性太差,建议将你的氨基酸序列做个疏水性分析。如果确实如此的话可能要重新构载体
我现在做重组表达,前期工作,把一段真核基因克隆到pET28a质粒上,基因前面有信号肽序列,测序结果没问题...
(4)图2中将构建好的重组质粒sufBC-PET28a导入受体细胞X.受体细胞最好选择大肠杆菌(酵母菌或大肠杆菌). (5)筛选含有目的基因的受体细胞X扩大培养,并诱导其表达融合蛋白SufBC.将融合蛋白与固体基质相连,再加入SufD蛋白,混合摇匀,然后洗去未结合的SufD蛋白.最后将固体基质上的蛋白洗脱下来进行电泳,结果如图3所示,这...
pet是T7启动子,BL21不含T7RNA聚合酶,所以不适于用BL21表达,应该是这个原因吧
1 可能是太弱你看不出来,建议用His抗体做个western 看看是不是有条带而看不出。2 是江始均施讲不...
1 可能是太弱你看不出来,建议用His抗体做个western 看看是不是有条带而看不出。
载体pet28a构建重组质粒,测序来自准确,转至BL21原核表达蛋白,,怎么也诱导不出来?同批次的BL21别人能诱导960化工网专业团队、用户为您解答,有载体pet28a构建重组质粒,测序来自准确,转至BL21原核表达蛋白,,怎么也诱导不出来?同批次的BL21别人能诱导的疑问