基于高免疫原性和纳米颗粒精确组装的优势,通过SpyTag/SpyCatcher系统组装mi3纳米颗粒和截短的S1蛋白,然后在HEK293F细胞中表达,进而产生和鉴定高效单克隆抗体 (mAb)。获得的5种mAb可与各种基因型PEDV结合,包括一种可在体外中和PEDV的G1和G...
1. 采集病料:从出现腹泻症状的猪只采集粪便或肠道组织等样品。 2. 提取病毒RNA:使用适当的试剂和方法从病料中提取PEDV的RNA。 3. 反转录PCR扩增:以提取的RNA为模板,利用反转录酶和特异性引物进行反转录PCR扩增,得到S1基因的DNA...
PEDV变异株的分离鉴定和S1基因序列分析
PEDV-RDB基因在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定 根据PEDV S蛋白基因序列(AKN45969.1)将目的基因设计合成之后,将合成的基因PEDV-RBD亚克隆至杆状病毒双表达载体的PH启动子下游,进行重组和鉴定。对重组杆粒Bacmid-PER进行鉴定,利用引物进行PCR扩增,鉴定成功后随后对其进行转染,获得重组杆状病毒rBV-PER。 PEDV-RBD基因结构示意...
2012—2017年从我国15个省400个猪场采集的猪腹泻样品中获得了1 235条PEDV的S1基因序列,通过遗传演化分析发现,这1 235株PEDV分别属于G1a、G1b、G2a和G2b亚型,占比分别为1.9%、9.6%、32.2%和56.3%;与经典毒株CV777(GenBank ID:AF353511)...
根据PEDV S蛋白基因序列(AKN45969.1)将目的基因设计合成之后,将合成的基因PEDV-RBD亚克隆至杆状病毒双表达载体的PH启动子下游,进行重组和鉴定。对重组杆粒Bacmid-PER进行鉴定,利用引物进行PCR扩增,鉴定成功后随后对其进行转染,获得重组杆状病毒rBV-PER。 PEDV-RBD基因结构示意图 ...
根据PEDV S蛋白基因序列(AKN45969.1)将目的基因设计合成之后,将合成的基因PEDV-RBD亚克隆至杆状病毒双表达载体的PH启动子下游,进行重组和鉴定。对重组杆粒Bacmid-PER进行鉴定,利用引物进行PCR扩增,鉴定成功后随后对其进行转染,获得重组杆状病毒rBV-PER。 PEDV-RBD基因结构示意图 ...
在PEDv的遗传进化研究中,全长S基因及其S1部分 (aa 1-735) 被认为是用于研究PEDV的遗传相关性和分子生物学的合适位点。尽管报道了PEDV仅有一种血清型,但S基因的系统发育研究表明,PEDV可以分为两个种群:经典株的GI群和流行毒株的G2群,每个种群内又可分为两个亚群,即G1a、G1b、G2a和G2b。
根据PEDV S蛋白基因序列(AKN45969.1)将目的基因设计合成之后,将合成的基因PEDV-RBD亚克隆至杆状病毒双表达载体的PH启动子下游,进行重组和鉴定。对重组杆粒Bacmid-PER进行鉴定,利用引物进行PCR扩增,鉴定成功后随后对其进行转染,获得重组杆状病毒rBV-PER。 PEDV-RBD基因结构示意图 ...
在基因上,S INDEL PEDV(G1b)的S1蛋白和基因组的其余部分分别与G1a和高致病性的G2 PEDV最接近(Lee,2015;Pensaert and Martelli,2016;Vlasova et al., 2014),该毒株最初被认为是有毒力的。然而,S INDEL PEDV在美国和欧洲最初爆发期间,田间猪死亡率低至零,与US non-S INDEL造成的哺乳仔猪高达100%的死亡率...