30230型Ni-NTA agarose,德国Qiagen公司;17-0510-01型Q-SepharoseTM Fast Flow、SephacrylTM S300,美国GE Healthcare Life公司。 1.3 实验方法 1.3.1 重组pET15b-PDE9A质粒诱导表达 将pET15b-PDE9A质粒转化至E.coli BL21感受态细胞中37 ℃培...
NTA-6074轴承。 意大利BECO超低温天然气低温潜液泵轴承代理商SSPA201。 德国NADELLA伸缩导轨NA1045S/BI。 英国RHP轴承22216EKJW33+11。 日本NB导轨滑块CDS25-1-300。 美国NHBB机身控制轴承SSRI2HA7CCCP25LDP。 IKO导轨_滑块LWHT20C1BHS1 日本NB交叉导轨经销商SGL20TE2-640 日本NMB不锈钢轴承MS14102-14P WHT14D...
通过亲和层析柱（如Ni-NTA纯化柱）将重组PDLIM1蛋白纯化并得到纯化样品。3. 鉴定纯化蛋白：使用SDS-PAGE和Western blot等方法，检测纯化的PDLIM1蛋白的分子量和纯度。同时，进行细菌内毒素检测，以确保纯化的蛋白没有细菌内毒素的污染。4. PDLIM1功能研究：a. 细胞转染：将PDLIM1蛋白转染到感兴趣的细胞系中，通...
将破碎溶液离心后沉淀溶于适量含有8m尿素的pbs缓冲液中,逐滴加入复性缓冲液(10mmtris-hclph8.0,400mml-arghydrochloride,2mmedta,0.5mmcysteamine)中进行复性,最后再利用ni-nta柱对复性后pd-1蛋白溶液进一步纯化,获得高纯度,构象均一性的抗原蛋白溶液。图2为pd-1蛋白胞外结构域蛋白表达鉴定的聚丙烯酰胺凝胶电泳图。
2.一种如权利要求1所述的人源化PD-L1单克隆抗体的制备方法, 其特征在于: 包括如下步骤:(1)制备PD-L1抗原: 构建含有PD-L1-ECD序列(GenBank Accession:AY714881.1)的真核表达的载体pCD-PD-L1-AVI-His, 瞬转Expi293细胞后收集上清, Ni-NTA亲和树脂纯化得到PD-L1蛋白;(2)兔单抗的产生: 制备重组人PD-L1抗...
5)ni-nta柱亲和层析纯化hpd-l2蛋白: a)取5mlni-nta填料置于玻璃柱中,自然沉降30min; b)利用30ml的ddh2o清洗柱子,然后用30ml平衡液(ph8.5,100mmtris-hcl,300mmnacl)平衡柱子,流速3s每滴; c)将待过柱的hpd-l2蛋白样品13000g,4℃离心15min,收集上清,0.45μm的滤膜进行过滤,待上样; ...
方法用 Ni - NTA 柱法纯化 pd20- TNF -α融合蛋白并进行 Western blotting 检测;采用 L929细胞毒法进行 pd20-TNF -α融合蛋白的生物学活性检测;用流式细胞术检测不同浓度融合蛋白作用于胃癌肝高转移潜能细胞 XGC9811- L的早期凋亡率,此实验分为5组:pd20- TNF -α100,00,25,00,6,25 U/ ml 分别为 ...
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【、f P d～ N i d ep o si t co nta ining 71 .3 pa l lad iu m 褒2 【。d T a ble 2 P r i :it s of P d i和硬金 镀层性能 比较 N i and A u— K i d ep osi t s 褒5 T ab le Pd— Ni和硬金 镀件抗气氛鹰蚀 性能 比较 ...
方法:利用Western blot,免疫沉淀,免疫荧光,Ni-NTA pull-down分析蛋白与蛋白之间的相互作用;利用点突变技术突变PD-L1/T285质粒为PD-L1/T285A;利用体外磷酸化激酶方法分析CK2是否诱导PD-L1/T285位点磷酸化.基因表达水平利用q PCR分析.细胞加入放线菌酮(CHX,Cycloheximide)分析CK2对PD-L1蛋白半衰期的影响;利用移植瘤...