一.荧光定量PCR基本原理 ➢定量PCR技术的产生1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB加入PCR反应体系,经改装的带有冷CCD的PCR仪检测样品的荧光强度核酸↔染料荧光后来用与双链DNA有更强结合力的SYBRGreenI取代EB 3 ➢荧光定量PCR的定量原理 RePaCl-Rti的m理e论C方he程m:isYt=rxie×s
—T GG T T T G A G GGC GA A T C —3′) 两 对 引 物 序 列 由 5′—3′端 输 入 DN A 合 成 仪 中, T r ity l o ff 系统合成, 氨水切落合成柱上的引物, 紫 外分光光度计测其吸收值进行定量。1 材料与方法 〔2〕 聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化方法见文献 。 N T 柱...
10、G35GE3GFEGFFGECG21( , )G78GB3G2AG36( )GDEG37G38G39 G3AG3B,G3CG3DG3EG3F G2DG6FG40G97GE3GFEGFFGECG21G78GB3G2AG36G2DG4EG51 G41G2A。GB8G42G97GB2GDEG37G51G43GE3GFEGFFGECG21G51G44G45G46G47G43G48G78G49GB4 G97G4AG4BG78G36G51G4CGB8GEAGECG30G31G3BG3CG3DGBD ...
一.荧光定量PCR基本原理 •定量PCR技术的产生 1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB加入PCR反应体系,经改装的带有冷CCD的PCR仪检测样品的荧光强度核酸↔染料荧光 后来用与双链DNA有更强结合力的SYBRGreenI取代EB •荧光定量PCR的定量原理 PCR的理论方程:Y=x×(1+Ev)nReal-timeChemistries Y:扩增物数量;...
一.荧光定量PCR基本原理 ➢定量PCR技术的产生1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB加入PCR反应体系,经改装的带有冷CCD的PCR仪检测样品的荧光强度核酸↔染料荧光后来用与双链DNA有更强结合力的SYBRGreenI取代EB ➢荧光定量PCR的定量原理 RePaCl-Rti的m理e论C方he程m:isYt=rxie×s(1+Ev)n Y:扩增物...
一.荧光定量PCR基本原理 ➢定量PCR技术的产生1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB加入PCR反应体系,经改装的带有冷CCD的PCR仪检测样品的荧光强度核酸↔染料荧光后来用与双链DNA有更强结合力的SYBRGreenI取代EB ➢荧光定量PCR的定量原理 RePaCl-Rti的m理e论C方he程m:isYt=rxie×s(1+Ev)n Y:扩增物...
一.荧光定量PCR基本原理 ➢定量PCR技术的产生1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB加入PCR反应体系,经改装的带有冷CCD的PCR仪检测样品的荧光强度核酸↔染料荧光后来用与双链DNA有更强结合力的SYBRGreenI取代EB ✓绝对定量——未知浓度的样品与标准曲线相比较 标准曲线•由系列稀释的已知浓度的样品做标准曲线...
一.荧光定量PCR基本原理 ➢定量PCR技术的产生1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB加入PCR反应体系,经改装的带有冷CCD的PCR仪检测样品的荧光强度核酸↔染料荧光后来用与双链DNA有更强结合力的SYBRGreenI取代EB ✓绝对定量——未知浓度的样品与标准曲线相比较 标准曲线•由系列稀释的已知浓度的样品做标准曲线...