PCR引物设计的原则主要有哪些?相关知识点: 试题来源: 解析 (1)引物长度:10～30Nt; (2)碱基分布:A、T、G、C随机分布; (3)G+C含量:40%～60%Tm=4(G+C)+2(A+T); (4)引物之间:避免3′端互补; (5)引物自身:不应形成二级结构; (6)引物3′末端碱基:最好选T、C、G,不选A; (7)引物5′末端...
设计引物的主要原则:(1)引物长度应大于16个核苷酸,一般为20~24个核苷酸;(2)引物与靶序列间的T值不应过低(一般不低于55℃);(3)引物不应有发夹结构,即不能有4bo以上的回文序列;(4)两引物间不应有大于4bp以上的互补序列或同源序列,在3端不应有任何互补碱基;(5)引物中碱基的分布尽可能均匀,G+C含量接近50...
引物长度要确保解链温度不低于54℃。(3)避免形成发夹结构,引物自身存在的连续互补序列,一般不超过3bp。(4)两个引物之间不应存在互补序列,尤其应避免3'端的互补重叠。(5)引物的碱基序列不应与非扩增区域有同源性。(6)引物3'端碱基一定要与模板DNA配对,最佳碱基选G和C。(7)引物的5'端可以修饰,如加限制酶位点...
1.用于PCR反应的引物需要两条,分别设在被扩增目的的片段的两端,并分别与模板正负链序列互补;2.引物的长度一般以18-25个核苷酸为宜,引物过长容易产生寡核苷酸的链内互补,形成发卡状结构,影响引物与模板之间的互补;3.两条引物之间尤其在3’端的序列不能有互补,以免形成引物二聚体;4.引物的碱基组成应平衡,避免出现...
PCR引物设计的原则包括( )。A.引物应用核酸保守区内设计使之具有特异性B.引物长度一般在15~30碱基之间C.引物自身及引物间不能有连续4个碱基的互补D.引物5’端可
PCR技术中引物设计的原则主要包括以下几点: 1. 引物长度:一般为15-30个碱基对,常用长度为18-27个碱基对。过长的引物可能导致扩增效率降低。 2. 引物GC含量:应控制在40%-60%之间,以45-55%为宜。GC含量对引物的退火温度(Tm值)有直接影响,过高或过低都可能影响扩增效果。 3. 产物长度:扩增的DNA片段长度...
简述PCR引物设计的原则? ①长度及碱基分布 引物长度一般为10-30个核苷酸。四种碱基分布应遵循随机原则,G+C含量一般为40%-60%,引物与非特异性扩增序列的同源性不应超过70%,避免有连续八个以上的碱基同源。 ②引物之间与引物自身 两引物之间不应有互补性,尤其应该避免3`端互补重叠以防引物二聚体的形成。一对引物...
简述PCR引物设计的原则。相关知识点: 试题来源: 解析 特异性:针对靶序列的特异性区域设计引物,引物与其他非目的DNA序列同源性不超过70%。3′末端不要有连续8个碱基与非目的基因序列同源。长度:引物的长度一般为18~24个核苷酸。二级结构:二条引物自身或引物之间(尤其在3'-OH末端)一般不应存在互补序列,以免形成二级...
百度试题 结果1 题目请简述PCR反应中引物设计的原则。相关知识点: 试题来源: 解析 答案:PCR反应中引物设计的原则包括:引物与模板DNA序列互补、引物长度适中(通常20-30个碱基)、Tm值接近、避免引物二聚体和非特异性扩增等。反馈 收藏