实时定量PCR反应试验结果处理: 1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算。 2、一般都是相对量,则用delta delta CT方法来计算。 3、举例如下:对照组基因A的CT值为20, 内参(比如βactin)CT值15。实验组基因A CT值18,内参CT值14。 4、首先算加样量:delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是说实验组的加样量...
学习做Realtime PCR, 实验结果是出来了,得到的内参、目的基因的Ct 值在15-25 之间,熔融曲线基本上也是单峰,但不太会处理这个结果,对着数据发愁.不同的处理方法得到不同的结果.做的是相对定量,SYBR Green, 选用2^(-△ △ Ct)法内参基因:对照组1、对照组2、对照组3实验组1、实验组2、实验组3目的基因:对照...
实时荧光定量PCR检测的数据处理及结果报告 卫生部临床检验中心李金明 基本概念 线性基线期(Linearbase-linephase)为PCR扩增的四个主要阶段之一(图)。线性基线期为扩增最初的10~15个循环,此时,PCR反应处于起始阶段,扩增产物很少,所产生的荧光信号很低,因此,基线荧光信号可根据此阶段产生的荧光信号来计算。...
实时荧光定量PCR检测的数据处理及结果报告 卫生部临床检验中心李金明 A 1 基本概念 线性基线期(Linearbase-linephase)为PCR扩增的四个主要阶段之一(图)。线性基线期为扩增最初的10~15个循环,此时,PCR反应处于起始阶段,扩增产物很少,所产生的荧光信号很低,因此,基线荧光信号可根据此阶段产生的荧光信号来计算。
还有对于内参基因的数据,如果所得Ct 值差值在1 以内,是否可以将所有的内参取平均,然后△ Ct 值就拿每个组的目的基因减去这个内参均值? 对于内参的CT 值怎样的数据算比较好呢?一般组间、组内CT 差值在多少比较合理? 另外对于这个REAL-TIME PCR 的结果除了用EXCEL 处理之外有没有其他比较可信方便...
实时荧光定量PCR检测的数据处理及结果报告 卫生部临床检验中心李金明 基本概念 线性基线期(Linearbase-linephase)为PCR扩增的四个主要阶段之一(图)。线性基线期为扩增最初的10~15个循环,此时,PCR反应处于起始阶段,扩增产物很少,所产生的荧光信号很低,因此,基线荧光信号可根据此阶段产生的荧光信号来计算。...
这两个图显示的是实时定量PCR的一组结果。上图是原始的线性图谱,下图则是处理过的指数图谱,但是它们两者表示的是同样的意思。x-轴表示PCR 循环数,y-轴表示扩增反应的荧光值,也就是扩增产物的量。这个图中有基线、阈值、Ct值这几个概念,从这几个值我们能够最终得到模板中目的基因的含量。(1)那么什么是...
1、实时荧光定量PCR检测的数据处理和结果报告、卫生部临床检测中心李金明、基本概念、线性基线阶段(Linearbase-linephase )是PCR放大的四个主要阶段之一(图)。 线性基线周期是放大的前1015个循环,在这种情况下,PCR反应处于开始阶段,放大的产物少,生成的荧光信号低,所以基线荧光信号可以从此阶段生成的荧光信号计算。
time PCR原理; 实时荧光Real-time PCR结果分析; CT值; 基线;1; 阈值线; 阈值线;常规新冠正常阳性曲线(ABI 7500 , Ct小于40);快检新冠正常阳性曲线(ABI7500 , Ct小于30); 判断扩增曲线是否良好的指标;;人员操作;人员操作;核酸样品;耗材;耗材;试剂;试剂;仪器;仪器;仪器;仪器;其他;实验室异常结果处理流程;...
实时荧光定量PCR检测的数据处理及结果报告.ppt,实时荧光定量PCR检测的数据处理及结果报告 卫生部临床检验中心 李金明 基本概念 线性基线期 (Linear base-line phase) 为PCR扩增的四个主要阶段之一(图)。线性基线期为扩增最初的10~15个循环,此时,PCR反应处于起始阶段,扩