荧光定量RT-PCR技术是世界各国疾病控制中心(CDC)采用的金标准(图2)。通常使用RT-PCR技术体外扩增病毒的RNA的两个片段,其中一个是编码核衣壳(N蛋白)的基因,另外一个编码S蛋白/M蛋白/E蛋白/1ab蛋白的基因。 虽然RT-PCR是世界各国公认检测病毒的金标准,但是,由于其准确率约为70%、耗时较长(4~6小时),且需要完...
第三代测序技术以纳米孔单分子测序技术为代表,最大的特点就是单分子测序,测序过程无需进行PCR扩增。基本原理是:DNA聚合酶和模板结合,4色荧色标记4种碱基(即dNTP),在碱基配对阶段,不同碱基的加入,会发出不同光,根据光的波长与峰值可判断进入的碱基类型。该技术简化了样品处理过程,避免了扩增可能引入的错配,且不...
数字PCR的兴起与重要性:数字PCR作为第三代PCR技术,具有绝对定量目标核酸的能力,在一些方面克服了传统检测技术的局限性,因此在医学诊断领域具有重要的研究价值。 dPCR技术原理:1992年,Sykes等人首次提出dPCR用于绝对测量的概念,用于检测基因的重链突变。1999年,Vogelstein和Kinzler首次使用“数字PCR”一词,并开发了一种基...
1. PCR技术:聚合酶链反应(PCR)是一种常用的ASF检测方法,可以检测ASFV DNA的存在和定量。近年来,实时PCR技术的应用更加广泛,实现了快速、准确的ASF诊断。同时,PCR方法还可以在一次反应中检测多种病原体,提高诊断效率。 2. 免疫学方法:包括酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫荧光分析等,用于检测ASFV抗体和抗原。ELISA方...
检测病毒的核酸的检测技术:高通量基因组测序,荧光定量RT-PCR,基于逆转录等温核酸扩增的检测技术,基于核酸的基因编辑体系的检测技术,基于核酸的微流控的检测技术;检测体内病毒抗原、抗体的检测技术:酶联免疫吸附测定(ELISA),IgG/IgM-胶体金...
三代基因测序技术以及基因检测技术的发展综述(6)|fish|pcr|基因测序|测序|测序仪基因是指携带有遗传信息的DNA序列,是控制性状的基本遗传单位,一段具有功能性的DNA序列。基因通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表现。人类约有两万至
三代基因测序技术以及基因检测技术的发展综述(1)|fish|pcr|基因测序|测序|测序仪基因是指携带有遗传信息的DNA序列,是控制性状的基本遗传单位,一段具有功能性的DNA序列。基因通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表现。人类约有两万至