答:①引物应用核酸序列保守区内设计并具有特异性②产物不能形成二级结构 ③引物长度一般在15——30碱基之间 ④J+C含量在40%-60%之间 ⑤碱基要随机分布 ⑥引物自身不能有连续四个碱基的互补 ⑦引物之间不能有连续四个碱基的互补 ⑧引物5‘端可以修饰 ⑨引物3‘端不可修饰 ⑩引物3’端要避开密码子的第三位反...
PCR过程中引物设计的基本原则有哪些?(参考答案)(1)引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-27bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于 Taq DNA聚合酶进行反应。(2)G+C含量:应在40%-60%之间。(3)碱基分布的随机性:应避免连续出现4个以上的单一碱基。尤其是不应在其3′端出现超过3个的连...
PCR引物设计的原则主要有哪些?相关知识点: 试题来源: 解析 (1)引物长度:10～30Nt; (2)碱基分布:A、T、G、C随机分布; (3)G+C含量:40%～60%Tm=4(G+C)+2(A+T); (4)引物之间:避免3′端互补; (5)引物自身:不应形成二级结构; (6)引物3′末端碱基:最好选T、C、G,不选A; (7)引物5′末端...
9. 特异性原则:引物必须与目标序列完全匹配,避免与其他非目标序列产生交叉反应。 10. 避免二级结构原则:引物内部应避免形成发夹结构、茎环结构等二级结构。 11. 选择保守区:在设计引物时,应尽量选择基因序列中的保守区域,以提高引物的通用性和稳定性。 12. 避免引物间相互作用:在设计上下游引物时,应注意避免引物间...
PCR技术中引物设计的原则主要包括以下几点: 1. 引物长度:一般为15-30个碱基对,常用长度为18-27个碱基对。过长的引物可能导致扩增效率降低。 2. 引物GC含量:应控制在40%-60%之间,以45-55%为宜。GC含量对引物的退火温度(Tm值)有直接影响,过高或过低都可能影响扩增效果。 3. 产物长度:扩增的DNA片段长度...
一、选择适当的引物长度引物长度是pcr引物设计的基本参数之一,一般而言,较短的引物长度可以减少引物间的非特异性结合,从而提高特异性。然而,引物长度也不能过短,否则可能会导致引物自身出现错配的情况。通常,引物长度在15-30碱基之间较为适宜。二、合理配置碱基组成引物中的碱基组成对其特异性有着重要影响。在引物设计...
6、Frq曲线为Oligo6软件新引进的一个指标,解释了序列片段存在的重复几率大小,选取引物时,应该用Frq值相对较低的片段; 7、引物二聚体及发卡结构的能量的绝对值一般不要超过4.5,否则容易产生引物二聚体而且会降低引物浓度从而导致PCR不能正常发生; 8、3'端最好不要是连续碱基,GGG或CCC会导致错误的引发,同时3'端...
1 )引物长度 15-30bp 20 左右为宜 长 / 短 2 )产物长度(跨度) 200-500bp 3 )引物的碱基 随机分布 GC 45-55% 4 )避免引物间互补 5 )避免引物自身互补 6 ) 3’ 端的碱基 2-8 个碱基应严格和模板配对 7 ) 5’ 端可以加入适当的修饰 如 RE 位点等人工接头 8 )特异性特别是 3’端 9 )引物...
⑸引物自身不能有连续4个碱基互补; ⑹引物之间不能有连续4个碱基的互补; ⑺引物端可以修饰; ⑻引物不可修饰; ⑼引物端要避开密码子的第三位。 答案解析 略 真诚赞赏,手留余香 小额打赏 169人已赞赏相似试题 (简答题) 简述PCR的原理和引物设计原则。 答案解析 (简答题) 简述PCR引物设计的基本原则及其注意...