它们表达高水平的CD56,CD94/NKG2A,NKp44和CD117/c-kit,L-选择素以及高亲和力的IL-2受体α链(CD25),但很少或不表达CD16及杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)。因此,CD56bright细胞的功能主要是分泌细胞因子,如干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)...
(3)巨噬细胞分化诱导 GM-CSF和M-CSF作为巨噬细胞诱导的启动和激活因子,可分别诱导单核细胞向M1型(抗炎)以及M2型(抗炎)巨噬细胞分化,促进其细胞因子分泌能力。将分离得到的单核细胞用含10 mL GM-CSF(10 ng/mL)或含M-CSF(25 ...
人的巨噬细胞包括经典活化型巨噬细胞(Classical activated macrophages, M1)及替代活化型巨噬细胞(Alternatively activated macrophages, M2)，显微镜下观察完成分化的细胞形态，M1细胞贴壁最牢，圆形或椭圆形；M2细胞贴壁能力较M1差，呈梭形；DC细胞不贴壁，成簇生长。M1巨噬细胞用20ng/ml的GM-CSF分化6天、M2巨噬细...
它们表达高水平的CD56,CD94/NKG2A,NKp44和CD117/c-kit,L-选择素以及高亲和力的IL-2受体α链(CD25),但很少或不表达CD16及杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)。因此,CD56bright细胞的功能主要是分泌细胞因子,如干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等。 NK细胞不表达...
接下来,我来给大家讲讲原代小鼠巨噬细胞的体外分离与培养。原代小鼠巨噬细胞可以从多个部位获得:比如经不同处理的骨髓(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子GM-CSF、巨噬细胞集落激活因子M-CSF或小鼠成纤维细胞L929的上清液)、腹腔(常驻或巯基...
用培养基(RPMI1640,10%FBS,1%双抗,2mM谷氨酰胺,5ng/mL IL-4与GM-CSF)调整PBMC浓度至合适,每孔约加入5*105个活PBMC,100uL体积。 重悬类器官混合液,分别加入等量的PBMC至96孔板中,总体积200uL。 三、培养观察 🔍 第一天观察并记录细胞状态。 将细胞置于37℃,5%CO2条件下培养,每日连续观察。 第三天吸出10...
2）酒精消毒采血管表面，在生物安全柜内打开，将外周血转入无菌15mL离心管；3）使用Ficoll法分离PBMC；4）PBMC计数，计算活力与与细胞数；5）使用培养基（RPMI1640，10%FBS，1%双抗，2mM谷氨酰胺，5ng/mL IL-4与GM-CSF），悬浮调整至合适浓度，96孔板，每孔约加入5*105 活PBMC，100uL体积；6）重悬类器官...
GM-CSFPBMC干扰素肿瘤坏死因子GM-CSP本身并不能诱导人外周血单核细胞(PBMC)产生TNP-α对LPS的刺激作用也不具有协同性,但与IFN-r联合刺激PBMC可以产生TNF-α,最大效应出现于刺激后18～24h,且呈明显的时间和剂量依赖关系,消炎痛和多粘菌素B对此效应无影响,排除了PGE2和LBS存在影响的可能性.丁传林南京医科大学微生物...
5)使用培养基(RPMI1640,10%FBS,1%双抗,2mM谷氨酰胺,5ng/mL IL-4与GM-CSF),悬浮调整至合适浓度,96孔板,每孔约加入5*105 活PBMC,100uL体积; 6)重悬类器官混合液,分别加入等量的样至96孔板中,至总体积200uL。 3、培养观察 1)D0观察记录细胞状态; ...
表达RORγt的ILC3亚群可分泌IL-17、IL-22和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。ILC3衍生的IL-22诱导肠上皮细胞(IEC)产生抗微生物肽,是IEC增殖和屏障功能的关键调节因子。ILC3衍生的GM-CSF会刺激从单核细胞到巨噬细胞的肠道分化。 巨噬细胞和树突状细胞是健康肠道中免疫调节细胞因子的另一来源。例如,CD...