Oligo(dT)亲和层析原理是基于DNA的互补配对原理。在Oligo(dT)亲和层析中,使用的是寡聚脱氧胸腺嘧啶核苷酸(oligo(dT))作为亲和基质。由于RNA中包含有多聚腺苷酸序列(poly(A)序列),而DNA亲和基质oligo(dT)具有与RNA的poly(A)序列互补的能力,因此可以通过互补配对将RNA选择性地固定在固相载体上。 二、操作步骤 1....
比如说,我们可以把oligo dt固定在一个固体的基质上,就像是把邀请函贴在墙上一样。当mRNA和oligo dt结合的时候,就被固定在这个基质上了。然后呢,我们就可以把那些没有结合的其他RNA都给冲走,就像用水把那些不需要的东西都冲掉一样。这个过程就像是在清理派对现场,只留下那些拿着邀请函被邀请的mRNA嘉宾。 不过呢...
Oligo dT磁珠的工作原理及应用 Oligo dT磁珠是一种表面共价修饰了寡聚dT序列,利用磁珠表面的寡聚dT序列可以和mRNA的polyA尾之间的碱基配对,因此可以从真核总RNA或者细胞、动植物组织等多种样本中快速分离纯度高且完整的mRNA。经Oligo dT磁珠纯化的mRNA,可应用于RT-PCR, 固相cDNA文库构建、二代测序、Northern Blot分...
这样的话,在环化反应产物中,携带PolyA尾巴的线性precusor前体将会结合到oligo(dT)亲和层析柱上面,而circRNA无法结合挂在oligo(dT)亲和层析柱上面,从而流穿。 第二种,利用circRNA与线性杂质RNA对oligo(dT)亲和层析填料的结合能力强弱差异,将两者分离。由于oligo(dT)亲和层析结合溶质的原理是基于T-A碱基配对。那么,溶质...
Seplife Oligo dT是蓝晓科技自主研发的一种新型高刚性亲和填料,主要用于捕获mRNA。Seplife Oligo dT以聚苯乙烯为基质,具有均一的超大孔径,表面进行了特定的长链间隔臂修饰并键合了自主开发dT配基,官能化聚(dT)基团,通过与mRNA 的polyA 尾巴碱基配对,可以高效捕获m...
Oligo dT可以和mRNA末端的polyA特异性结合，从而把mRNA从总RNA总分离出来。
mRNA大量提取纯化亲和层析法—CIMmultusOligodT 大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理.具体到实验手段上。 mRNA 具有大分子质量,也对剪切力敏感。 整体色谱柱的大通道结构允许大分子自由进入,并且层流可...
至于Gsp,只是在扩增已知gene/gene family以及部分原理的RACE中使用. 用随机引物时要去除总RNA中的tRNA rRNA, 只保留mRNA 如果接下来你的PCR产物是外显子,就用oligo dT; 如果是内含子或者包括部分内含子,就用random mRNA反转录之后的cDNA为模板进行PCR,不都是外显子吗?内含子在这之前都被剪切掉了。所以不知道“...
本产品的原理和主要操作流程如图1所示。UltraBio™ Oligo (dT)25磁珠表面共价修饰了25聚dT序列即Oligo (dT)25,当真核细胞、动植物组织的裂解液或抽提的总RNA与UltraBio™ Oligo (dT)25', "磁珠混合后,磁珠表面的寡聚dT序列与mRNA等3'端的poly(A)进行碱基配对而特异性结合,然后在外界磁场的作用下,磁珠与...