在操作过程中，建议加入蛋白酶抑制剂（需避免EDTA），并将整个过程维持在4℃条件下进行。若出现杂蛋白与标签蛋白相互作用的问题，可在超声处理细胞之前，通过增加洗涤剂浓度（如使用2% Triton X-100和2%吐温-20的混合溶液），或添加50%甘油的洗涤液，来破坏这些非特异性相互作用。
DTT可还原IMAC琼脂糖的金属离子,通常会使琼脂糖的颜色变为棕色。 EDTA对于结合能力的影响更为显著。许多缓冲液中有这种六价螯合剂来减少金属离子的干扰。我们的实验显示较高浓度EDTA中Ni-NTA比Ni-IDA更有活力。Ni-NTA的结合能力呈非线性降低,EDTA浓度达到1mM时总体下降了46%,之后略微下调。在EDTA浓度达到1mM前, N...
英文名Nickel Column Stripping Buffer for Ni-NTA/Ni-IDA (Contain 100 mM EDTA) 相关类别蛋白纯化与层析最新产品储存常温(10-30℃) 编 号包装库存目录价(￥)您的价格(￥)数量 C601012-0100100 ML现货105105 C601012-0500500 ML现货263263 产品描述
在磁性纳米颗粒上修饰EDTA可以用于捕获和分离含有特定金属离子的蛋白质或其他生物分子。 Ni-NTA修饰: Ni-NTA是一种特定的金属亲和配体,通常用于结合带有组氨酸标签的蛋白质。当磁珠表面修饰有Ni-NTA后,它们可以特异性地捕获和纯化带有His标签的蛋白质。 应用: 蛋白质纯化: 通过使用Ni-NTA修饰的磁珠,可以非常高效地从...
1. 用10倍柱体积的stripping buffer(50 mM NaH2PO4 ,300 mM NaCl,100 mM EDTA,pH 8.0)进行清洗。 2. 用10倍柱体积去离子水清洗树脂。 3. 用两倍柱体积的100 mM NiSO4(溶解于去离子水中) 洗涤树脂。 4. 用10倍柱体积的1X PBS重新平衡,树脂可进行使用或是用20%的乙醇存储。
Ni-NTA琼脂糖凝胶FF以琼脂糖微球为基质,通过活化偶联次氮基三乙酸(NTA),再螯合Ni2+。与亚氨基二乙酸(IDA)相比,具有更好的螯合剂、还原剂、碱性的耐受性,如样品中含有1-10mM EDTA或1-10mM β-巯基乙醇或5mM DTT,可正常纯化;在螯合镍的情况下,也可以用0.1M NaOH清洗。Ni-NTA琼脂糖凝胶FF主要用于纯化带...
螯合剂, 例如 EDTA,EGTA,柠檬酸,组氨酸等。 酸碱稳定性 短期(2 h)pH 2~14 储存缓冲液 20%乙醇 储存温度 4~8。C 不可冻存 C600792 产品信息: C600792 Ni-NTA 纯化树脂预装柱(中压) 规格 1 mL 5 mL 基质 6%高度交联琼脂糖凝胶 蛋白结合能力 约10-40 mg 组氨酸标签蛋白/1mL 树脂 平均粒径 90 μ...
④ NI-NTA上的Ni可以通过EDTA进行螯合竞争洗脱下来。⑤ 同样的道理，其他过渡金属离子如Cu2+、Co2+等...
Ni-NTA琼脂糖凝胶FF以琼脂糖微球为基质,通过活化偶联次氮基三乙酸(NTA),再螯合Ni2+。与亚氨基二乙酸(IDA)相比,具有更好的螯合剂、还原剂、碱性的耐受性,如样品中含有1-10mM EDTA或1-10mM β-巯基乙醇或5mM DTT,可正常纯化;在螯合镍的情况下,也可以用0.1M NaOH清洗。 Ni-NTA琼脂糖凝胶FF主要用于纯化带组氨...
(3)缓冲液中不能含有EDTA和柠檬酸盐,也最好不含巯基乙醇等还原剂。 (4)常用缓冲液有10~20m M磷酸钠盐缓冲液和50mM醋酸钠缓冲液 (5)在缓冲液中要加入0.15~0.5M的NaCl,以消除离子交换作用。 (6)使用金属螯合层析有一个通常的法则,如果不了解蛋白的结合特性,建议先选用Zn2+,缓冲液可以选择中性的磷酸盐或者...