亲和层析是一种常用的蛋白质纯化方法,其中Ni-NTA柱是一种常见的选择。以下是使用Ni-NTA柱进行亲和层析时需要注意的事项: 无菌操作 🦠 整个操作过程必须严格无菌,避免任何污染。 温度控制 🌡️ 在样品加载和洗涤过程中,保持低温操作,以减少蛋白质的降解。 流速控制 ⚡ 样品加载和洗涤的流速不宜过快,以免影响...
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Ni柱填料一般有两种,NTA和IDA亲和柱,你这个大小的蛋白1ml填料理想状况可以吸附20mg以上,最多2ml填料不就够了 .这种柱子一般不用大体积,一般装柱都是1-2ml填料,我也用过5-10ml填料的,按比例使用同等条件洗脱效果比小体积的柱子要差很多.纯化是纯度和效率的矛盾,你需要什么样的纯度,需要多大量,我对你的实验并不...
加一点Ni柱（这样Ni柱占的比例就加大很多），孵育、电泳试试。也可以试试离子交换层析。
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