亲和层析是一种常用的蛋白质纯化方法,其中Ni-NTA柱是一种常见的选择。以下是使用Ni-NTA柱进行亲和层析时需要注意的事项: 无菌操作 🦠 整个操作过程必须严格无菌,避免任何污染。 温度控制 🌡️ 在样品加载和洗涤过程中,保持低温操作,以减少蛋白质的降解。 流速控制 ⚡ 样品加载和洗涤的流速不宜过快,以免影响...
Ni柱亲和层析,顾名思义,就是利用镍离子(Ni²⁺)与带有6x His标签的重组蛋白之间的强结合力来实现分离。简单来说,就是通过一个带有Ni²⁺的树脂基质(比如Ni-NTA或Ni-IMAC树脂)来捕获带有His标签的目标蛋白。 固定化金属亲和基质:层析柱里填充的是一种结合了Ni²⁺的树脂基质。Ni²⁺离子通过螯合剂...
半胱氨酸和色氨酸也能与固定金属离子结合,但这种结合力要远小于组氨酸残基与金属离子的结合力。 镍NTA亲和层析介质(Ni-NTA )具有特异性好、流速快的优点,颗粒粒度均匀,粒径小,并且螯合镍更稳定,能耐受更高的还原剂,物理和化学稳定性好,批次重复性好。本产品已经螯合好镍离子,使用更方便。 二、 性能参数: 三、...
Ni-NTA亲和层析介质(L00250)是把螯合剂(氮川三乙酸或NTA)共价偶联到琼脂糖介质(4%交联)上,然后再螯合Ni2+制备而成。NTA能够通过四个位点牢固的螯合Ni2+从而减少纯化过程中Ni2+泄露到蛋白样品中。金斯瑞亲和层析介质可以纯化任何表达系统(原核,酵母,昆虫细胞和哺乳动物细胞等表达系统)表达的天然或变性的His-标签蛋...
Ni-NTA亲和树脂灌装层析柱或直接使用预装柱,层析柱下端接核酸蛋白检测仪。 (所有溶液/样品液使用前建议离心或用0.22μm 或0.45μm滤膜过滤后再上柱。) 2.1 用3～5倍柱床体积的去离子水冲洗掉层析柱树脂保护液。 2.2 使用至少5倍柱床体积的裂解缓冲液平衡层析柱。
镍NTA亲和层析介质(Ni-NTA )具有特异性好、流速快的优点,颗粒粒度均匀,粒径小,并且螯合镍更稳定,能耐受更高的还原剂,物理和化学稳定性好,批次重复性好。本产品已经螯合好镍离子,使用更方便。 二、 性能参数: 特点 基团密度高,载量大,分辨率高,使用方便 基质 6%的交联琼脂糖凝胶 配体 Ni2+ 配体密度 20-40...
镍离子金属鳌合亲和层析介质(NiNTA)说明.pdf,镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA )说明书 一、 简介 金属螯合亲和层析介质,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的一些氨 2+ 2+ 2+ 2+ 3+ 基酸,如组氨酸能与多种过渡金属离子如Cu ,Zn ,Ni ,Co ,Fe 发生
镍离子金属鳌合亲和层析介质〔Ni-NTA〕说明书 一、简介 金属螯合亲和层析介质,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利 用蛋白质外表的一些氨基酸,如组氨酸能与多种过渡金属离子如 Cu,Zn,Ni,Co,Fe发生特别的相互作用,能够吸附富含这类氨基 酸的蛋白质,从而到达分别纯化的目的。因此,偶联这些金属离子 ...
Ni-NTA亲和层析介质的Ni2+脱落率非常低，它能耐受蛋白纯化过程中使用的很多添加剂，并且有着较高的蛋白结合能力和稳定性，因此Ni-NTA亲和层析介质非常适用于多组氨酸重组蛋白的纯化。我们提供10 ml，25ml，500 ml三种规格的包装。表1：产品特征 柱体积10 ml、25 ml和500 ml（20 ml、50 ml和1000 ml的50 %悬...
镍离子金属螯合亲和层析介质最经典的配体是IDA。镍离子有六个螯合价数,Ni-IDA螯合了三价,剩余三价;而Ni-NTA螯合四价,剩余两价,因此Ni-IDA琼脂糖凝胶作用力要比Ni-NTA琼脂糖凝胶的强。也正因为这个原因,在同样条件下Ni-IDA洗杂质和目标蛋白的要比Ni-NTA的咪唑浓度高,但是NTA的填料更稳定,耐受更强的还原剂,更...