NF_KB的激活与检测方法NF_KB的激活与检测方法 生命活动中的一系列重要过程如细胞增殖、分化等是通过基因表达来实现的,这种基因表达控制首先通过特定转录因子在转录水平上进行。核转录因子(nuclear transcription factor)是一类蛋白质,它们具有和某些基因上启动子(promotor)区的固定核苷酸序列结合,而启动基因转录的功能。核...
一类为P50( NF- KB1)和P52( NF- KB2), 分别由含有C-末端锚蛋白重复序列(ahkrin repeat motif)的前体蛋白p105和p100通过ATP依赖蛋白水解过程裂解而形成。该类蛋白含有RHD,但缺乏转录活性区,无独立激活基因转录的功能。另一类为p65(RelA),Rel(c-Rel),Rel B和果蝇的dorsal、Dif和Relish,它们没有前体,除N端...
以下是一些常用的验证NF-κB信号通路的方法:1、印迹(Westernblotting):通过检测NF-κB信号通路中的蛋白质表达和磷酸化水平,可以确定是否存在活性的NF-κB信号通路。通过提取细胞或组织的蛋白质,使用特定的抗体标记NF-κB蛋白质或其下游效应蛋白质,使用免疫印迹技术检测蛋白质的表达水平。2、荧光染色和...
1. 胞内和核内NF-kB的量,也就是要区别核蛋白和胞浆蛋白,这个可以用WB;2. 检测IkB的磷酸化,这...
如果是用血液做的话,即使检测出了NF-kB,也是细胞里的NF-kB。如果是想通过NF-kB来反应机体的炎症...
释放后的NF-kB可以通过例如修饰自身的亚单位的方式来影响自身的转录激活效能。活化的NF-κB快速的诱导编码IκBα的基因的转录,因此产生高水平的自身抑制剂。新合成的自由的IκBα进入细胞核内,然后使DNA上NF-κB解离并且将NF-κB排出细胞核,因而恢复到静息状态。 3.生物学功能 3.1NF-κ B与细胞凋亡 3.1.1抗...
9.一种基于硫化银光热效应的生物传感器定量检测NF-kB1浓度的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤: A、多次重复上述步骤(1)~步骤(5),得到多组步骤(5)反应之后的反应液; B、分别向步骤(5)反应之后的反应液中加入不同浓度的NF-kB11溶液,反应1h; C、步骤B反应结束后,移取羧基功能化的孔板中的反应液加入到...
看你什么用途 你不管是IHC还是WB还有PCR都可以的
Western blot检测NF-B简便经济,不需要专门仪器,操作简单,耗时少,是目前检测NF-B常用的一种方法。不足之处是不能直接反映NF-B活性,而且部分转录因子功能改变时,只是由于活性变化所引起,蛋白总量并不发生改变,Western blot不能反映出这种由于活性改变引起的NF-B功能变化,其特异性也有待进一步提高【22】。4.2 凝胶...
检测方法 4.1.蛋白印迹(Western blot)和互相平行的? 说明:两条直线有相交和平行两种位置关系,当两条直可以从两个方面应用Western blot进行检测,一是NF-κB的表达量,生理条件下NF-κB存在一定量表达,疾病及各种外源刺激下NF-κB表达量发生异常改变;二是可以检测细胞质中IκB的降解,细胞未受到任何刺激时,细胞质中...