N-连接糖基化(N-linked glycosylation)是一种常见的蛋白质翻译后修饰,发生在一半以上的哺乳动物蛋白质上;与只有单一结构的小分子修饰(如甲基化、磷酸化)完全不同,N-糖基化具有多维结构特征(单糖组成、序列、连接、异头物),从而产生数目庞大的 N-聚糖...
N-糖基化蛋白质组首先对蛋白质进行酶解,随后利用凝集素(lectin)富集N-糖基化肽段,再用N-糖酰胺酶(PNGase)在重水中切除糖链,发生N-糖基化的天冬酰胺残基分子量增加2.989Da,利用质谱可测定分子量是否发生对应的质量偏移,从而检测N糖基化修饰及位点。 ·技术路线 ·技术优势 1. 关注度持续攀升的糖基化修饰,研...
该研究运用点击化学结合代谢糖标记(metabolic glycan labeling, MGL)策略,全面分析了水稻幼苗中的N-糖基化修饰蛋白组。研究人员比较了不同含有生物正交基团的单糖类似物,最终选用N-叠氮乙酰基半乳糖胺(GalNAz)作为水稻幼苗的代谢糖标记物。...
N-糖基化修饰是通过一系列步骤完成的:首先,核苷酸活化的糖基被连续添加到脂质载体上形成七聚糖结构;随后,这一寡聚糖结构通过ABC(ATP binding cassette,ATP结合盒)转运系统跨越内膜进入周间质;最后,在周间质中由相应的糖基转移酶完成蛋白的糖基化。细菌0-糖基化修饰系统主要作用于鞭毛蛋白,在O-糖基化中,低聚糖...
N-糖基化是一种最常见的蛋白质翻译后修饰方式,主要是指糖基链(glycan)通过N-糖苷键连接到蛋白质的氨基酸残基上。N-糖基化可以影响蛋白质的稳定性、分子识别、信号传导等多种生物过程,甚至与多种疾病(如癌症、神经退化性疾病)的发生发展密切相关。 二、研究方法 ...
糖基化修饰主要发生在内质网和高尔基体。主要过程是将糖基在糖基转移酶作用下将糖链转移至蛋白质,和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键,经过一系列转运、糖链末端的剪切,修饰和岩藻糖化或者唾液酸化等完成糖基化蛋白质的组装(以N糖基化的组装过程为例,见图1)。
N-糖基化:N-连接的糖链合成起始于内质网,完成于高尔基体。在内质网形成的糖蛋白具有相似的糖链,由Cis面进入高尔基体后,在各膜囊之间的转运过程中,发生了一系列有序的加工和修饰,原来糖链中的大部分甘露糖被切除,但又被多种糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子,形成了结构各异的寡糖链。
N-糖基化是指在蛋白质的N-乙酰氨基葡萄糖胺上添加糖链的过程,而O-糖基化是指在蛋白质的丝氨酸或苏氨酸上添加糖链的过程。 N-糖基化过程是在内质网中完成的。首先,一个14糖的核心寡糖被添加到新合成的蛋白质上。这个核心寡糖由5个N-乙酰氨基葡萄糖胺、3个葡萄糖和7个磷酸酯组成。然后,在添加了核心寡糖的...
N糖基化位点如果存在N糖基修饰的话,那么切N糖处理后,理论上发生N糖基化修饰的位点会水解生成天冬氨酸,即发生了脱酰胺修饰,由此可通过检测切N糖处理的样品是否发生脱酰胺修饰来进行进一步的确认。同时,也可以通过切N糖基前后的脱酰胺修饰比例差值来表征N糖基化位点占有率,这种方法,其实与同位素标记水解的思路一致,...
N-糖基化修饰是一种普遍且重要的蛋白质翻译后修饰,调控蛋白质折叠、运输及生物学功能,在植物生长发育和胁迫响应中起关键作用。水稻是全球近一半人口的主食,在全球粮食生产中具有举足轻重的地位。近年来,随着全球人口的持续增长和生活水平的提高,对水稻产量和品质的需求日益增加。已有研究表明,N-糖基化修饰通过调节根系...