微量热泳动(microscale thermophoresis,MST)是一种分析生物分子相互作用的技术。MST技术是一种基于检测在温度梯度中的生物分子电泳迁移率的变化而检测生物分子间结合、解离过程,获取分子间相互作用的模式和动力学常数等方面信息的新技术,是近年来发展的研究生物分子相互作用的强有力工具,已广泛应用于药物筛选、信号转...
在微量热泳动 (MST)实验中,研究者使用纯化的NLRP6蛋白,定量检测其与不同类型的核酸分子(dsDNA/dsRNA/ssDNA/ssRNA) 之间相互作用。微量热泳动 (MST)结果表明:NLRP6 优先结合dsRNA (KD=1.2 μM) 而非其他核酸 (图3A-3D)。此外,微量热泳动 (MST)结果还显示: NLRP6 蛋白不与脂多糖(LPS)结合 (图3F),但...
微量热涌动(MicroScale Thermophoresis,MST)技术是一种基于检测在温度梯度中的生物分子电泳迁移率的变化而检测生物分子间结合、解离过程,获取分子间相互作用的模式和动力学常数等方面信息的新技术[1],广泛用于预防医学与公共卫生学、基础医学、临床医学、生物学等生命科学领域的研究,具有无需固定样品、样品用量极小、可在...
微量热泳动(MST)是一种简单、快速、精确定量生物分子相互作用的方法。它可以测量分子在微观温度梯度场中的运动,以及检测分子水化层、电荷和大小的改变,从而定量检测生物分子间的相互作用。当进行MST实验的时候,样品由红外激光加热产生一个微观的温度梯度场,再通过共价结合的荧光染料来监测和定量分子的定向运动。应用范...
微量热泳动技术 (Microscale Thermophoresis,MST) 是一种定量分析生物分子间相互作用的前沿技术,通过精确检测荧光变化,结合灵敏的热泳动现象,定量分析分子间相互作用。实验时对互作分子中的一个分子进行荧光标记,使之成为非常灵敏的标签分子,在 MST 技术中称之为 Target;与之互作的另一个分子称之为 Ligand。
研究人员首先从化合物库筛选得到了两种小分子,随后用MST微量热泳动进一步验证了mHTT、LC3以及正常亨廷顿蛋白与这些小分子的相互作用。mHTT、LC3、正常亨廷顿蛋白与小分子的结合亲和力数据实验结果同时表明:这些小分子是通过polyQ (polyglutamine)多聚谷氨酰胺去结合mHTT的,进一步为polyQ疾病药物开发奠定基础 案例三:...
采用 MST 微量热泳动技术进一步验证了上述结论,研究人员通过表达纯化 NasT-GFP 融合蛋白(纯化 GFP 融合蛋白可以避免宿主蛋白对 MST 实验的干扰),再利用 MST 技术测定 NasT-GFP 融合蛋白与 c-di-GMP 的亲和力,结果发现 NasT-GFP 融合蛋白能够与 c-di-GMP 结合,且亲和力值 Kd 为 6.49 ±2.44 μM,而...
MST(MicroScale Thermophoresis)微量热泳动可以定量分析分子间相互作用。实验时对互作分子中的一个分子进行荧光标记,使之成为非常灵敏的标签分子,在 MST 技术中称之为 Target;与之互作的另一个分子称之为 Ligand。Target 分子与 Ligand 分子结合形成复合物,复合物分子的尺寸、水化层和电荷的改变都可以导致复合物分子...
利用MST微量热泳动实验验证了FER/ANJ和PCP-Bs相互作用(图1G),共同调控柱头活性氧水平和影响花粉水合。图1.PCP-Bs通过FER/ANJ受体激酶影响柱头活性氧和花粉水合,图G为MST实验结果 进一步研究还发现,柱头乳突细胞自分泌的RALF33小肽通过FER/ANJ-LLG1-ROP2-RBOHD信号通路引起活性氧产生。而PCP-Bγ小肽可以...
在研究过程中,研究人员使用MST微量热泳动分子互作技术验证并定量了受体FER/ANJ/HERK1/CVY1与自身分泌的小肽sRALF33以及花粉分泌的小肽pRALF11/26的互作。这也是瞿礼嘉/钟声团队继2017年Science和2022年Science后第三次用MST检测蛋白和多肽的亲和力。在该互作研究中,涉及到3种小肽,共12组的KD检测,MST检测一对...