为确认 LDA 和 TRAF2 是否直接结合,研究者采用了微量热泳动实验(MST)测得 LDA 与 TRAF2 的平衡解离常数 Kd=6.02 μM,而作为 LDA 类似物的 OA 却不能结合 TRAF2,表明了 LDA 可直接结合 TRAF2 蛋白(图4A,B)。 图4 MST 测定 LDA 直接结合 TRAF2 蛋白 为进一步确定 LDA 与 TRAF2 蛋白相互
微量热涌动(MicroScale Thermophoresis,MST)技术是一种基于检测在温度梯度中的生物分子电泳迁移率的变化而检测生物分子间结合、解离过程,获取分子间相互作用的模式和动力学常数等方面信息的新技术[1],广泛用于预防医学与公共卫生学、基础医学、临床医学、生物学等生命科学领域的研究,具有无需固定样品、样品用量极小、可...
采用 MST 微量热泳动技术进一步验证了上述结论，研究人员通过表达纯化 NasT-GFP 融合蛋白（纯化 GFP 融合蛋白可以避免宿主蛋白对 MST 实验的干扰），再利用 MST 技术测定 NasT-GFP 融合蛋白与 c-di-GMP 的亲和力，结果发现 NasT-GFP 融合蛋白能够与 c-di-GMP 结合，且亲和力值 Kd 为 6.49 ±2.44 μM，而...
MST (Microscale Thermophoresis) 微量热泳动技术,是一种定量分析生物分子间相互作用的前沿技术。通过检测在温度梯度场中荧光标记生物分子泳动速率的差异,定量分析分子间相互作用的亲和力。实验时对互作分子中的一个分子进行荧光标记,使之成为非常灵敏的标签分子,在 MST 技术中称之为 Target;与之互作的另一个分子称之...
微量热泳动技术 (Microscale Thermophoresis，MST) 是一种定量分析生物分子间相互作用的前沿技术，通过精确检测荧光变化，结合灵敏的热泳动现象，定量分析分子间相互作用。实验时对互作分子中的一个分子进行荧光标记，使之成为非常灵敏的标签分子，在 MST 技术中称之为 Target；与之互作的另一个分子称之为 Ligand。
微量热泳动(MST)是一种简单、快速、精确定量生物分子相互作用的方法。它可以测量分子在微观温度梯度场中的运动,以及检测分子水化层、电荷和大小的改变,从而定量检测生物分子间的相互作用。当进行MST实验的时候,样品由红外激光加热产生一个微观的温度梯度场,再通过共价结合的荧光染料来监测和定量分子的定向运动。应用范...
微量热泳动（microscale thermophoresis,MST）是一种分析生物分子相互作用的技术。MST技术是一种基于检测在温度梯度中的生物分子电泳迁移率的变化而检测生物分子间结合、解离过程，获取分子间相互作用的模式和动力学常数等方面信息的新技术，是近年来发展的研究生物分子相互作用的强有力工具，已广泛应用于药物筛选、信号转...
本研究中，作者通过免纯化MST微量热泳动技术，直接利用细胞裂解上清液进行微量热泳动(MST)实验验证谷氨酸、小分子 LK-2 与 ASIC1a 通道(膜蛋白)的结合(图1)。图1 MST微量热泳动技术验证谷氨酸、小分子LK-2与ASIC1a蛋白的结合 二 案例二：蛋白质与小分子 2024年，苏州大学周芳芳研究团队在《Cell》杂志上发表...
MST (Microscale Thermophoresis) 微量热泳动技术,是一种定量分析生物分子间相互作用的前沿技术。通过精确检测荧光变化,结合灵敏的热泳动现象,定量分析分子间相互作用。 实验时对互作分子中的一个分子进行荧光标记,使之成为非常灵敏的标签分子,在 MST 技术中称之为 Target;与之互作的另一个分子称之为 Ligand。Target...
研究人员首先从化合物库筛选得到了两种小分子，随后用MST微量热泳动进一步验证了mHTT、LC3以及正常亨廷顿蛋白与这些小分子的相互作用。mHTT、LC3、正常亨廷顿蛋白与小分子的结合亲和力数据实验结果同时表明：这些小分子是通过polyQ (polyglutamine)多聚谷氨酰胺去结合mHTT的，进一步为polyQ疾病药物开发奠定基础 案例三：...