1、诊断Lynch综合征:MSI是Lynch综合征的重要生物学标记,当MSI-H被证实,该诊断即可成立。 2、判断预后及治疗效果:MSI-H的结直肠癌患者对化疗药物5-氟尿嘧啶的疗效不佳。 3、鉴别遗传性胚系来源与散发性来源的MSI结直肠癌:散发性MSI-H结直肠癌的病因通常是hMLH1基因启动子甲基化,只有小部分为BRAF基因突变致MMR基因...
主要采用多重荧光PCR结合毛细管电泳的方法,通过PCR扩增特定的微卫星序列,然后通过毛细管电泳比较肿瘤组织与正常组织微卫星序列长度的差异来判断该位点是否存在MSI现象。 这种检测方法是公认的MSI检测的金标准,也是使用最广泛的方法。 最开始使用的是National Cancer Institute(NCI)推荐的5个位点: 两个单核苷酸重复BAT-25、...
MSI检测方法 1.免疫组化方法(IHC)免疫组化方法仅用于与肿瘤细胞中的MLH1,MSH2,MSH6和PMS2蛋白结 合。如果没有结合任何的蛋白,就证明发生了MSI。2.直接测序法 对MMR基因各区域(MLH1、MSH2、MSH6等)的扩增产物直接测序。3.多重荧光PCR 采用多重荧光PCR的方法对NCI建议的位点进行扩增,以确定MSI状态。www.ppt...
MSI检测方法主要有三种:免疫组化(IHC)、PCR和NGS。IHC方法使用抗体检测4种DNA错配修复蛋白在细胞核内的表达,若存在表达缺失,则判定为错配修复缺陷(dMMR),即MSI-H;四个蛋白全部表达则为错配修复功能正常(pMMR),即MSI-L或MSS。IHC方法应用广泛,能确定MMR蛋白表达缺失,但主观性强,受抗体...
目前,MSI相关的检测方法主要有3种:免疫组化(IHC)、聚合酶链式反应(PCR)和二代测序(NGS)。 方法1 免疫组化(IHC) 免疫组化(IHC)是目前最常用的检测方式,通过使用相应抗体检测四种常见错配修复基因(MLH1、MSH2、MSH6和PMS2)在细胞核内表达的情况,明确是否存在错配修复缺陷。存在1种或以上蛋白表达阴性即为错配修...
目前已获得 FDA 批准的 MSI 检测方法主要有 3 种,分别是:免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)法,多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)法以及二代测序(next generation sequencing, NGS)法。 IHC 法 IHC通过特异性的抗体与肿瘤组织切片上...
1.检测技术概览:当前,针对肿瘤的错配修复/微卫星不稳定(MMR/MSI)状态,主要采用三种检测技术:免疫组织化学(IHC)、聚合酶链反应(PCR)的改良版(Oncopanel),以及下一代基因测序(NGS)。 2.NGS的先进性:近期的研究揭示,Oncopanel NGS在识别dMMR患者方面显示出比IHC更高的准确性,能够发现IHC可能遗漏的15%的dMMR病例...
李红老师:目前MSI检测方法包括荧光PCR-毛细管电泳法以及NGS法,检测位点涉及单核苷酸重复位点及双核苷酸重复位点。《结直肠癌及其他相关实体瘤微卫星不稳定性检测中国专家共识》明确指出PCR毛细管电泳法是MSI检测的“金标准”,基于 PCR法中的 Pentaplex pa...
经过中心实验室重新验证后,5例原发耐药的患者中有3例 (60%)MSI和dMMR状态发生误判:2例仅经一种方法检测;1例IHC和PCR结果不一致。并且其中2例为PCR结果存在误判,1例为IHC法误判。 该研究同时对来自法国6家医院被评估为dMMR或MSI的93例患者进行了检测结果的验证,其中有9例(10%)存在MSI假阳性的误判,其中6例...
1.一种MSI检测方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、分别提取同一患者的正常粘膜组织的DNA与肿瘤组织的DNA,并分别选取贝斯塔遗传标记:Bat26,Bat25,D5S346,D2S123和D17S250这5个位点进行扩增引物标记荧光;S2、分别对步骤S1中得到的同一患者的正常粘膜组织的DNA与肿瘤组织的DNA进行PCR扩增:S2.1、取离心管,加入12μl的...