(Ji-hang Yuan, 2014, Cancer Cell)实验流程MS2-RIP技术主要流程包括:MS2蛋白表达载体构建、MS2 BS-lncRNA载体构建、共转化细胞、免疫沉淀、结果分析。MS2蛋白表达载体构建:在MS2两端添加Flag标签和GFP,Flag标签氨基酸序列较短,一般不会干扰MS2的天然构象,可作为纯化标签,GFP可用于观察融合蛋白Flag-MS2-EGFP的...
反转录PCR和实时定量PCR结果表示候选基因在雄性不育个体的花药中表达明显,原位杂交结果显示,候选基因在ms2的突变体的花药中表达,但在野生型材料中并没有检测到杂交信号。为了验证候选基因的位置特异性表达受TRIM的插入调控,对小麦的不同组织,包括花药,茎,雌蕊等组织分别进行GFP融合瞬时表达实验,结果表明只在花药...
MS2-RIP技术主要流程包括:MS2蛋白表达载体构建、MS2 BS-lncRNA载体构建、共转化细胞、免疫沉淀、结果分析。 MS2蛋白表达载体构建:在MS2两端添加Flag标签和GFP,Flag标签氨基酸序列较短,一般不会干扰MS2的天然构象,可作为纯化标签,GFP可用于观察融合蛋白Flag-MS2-EGFP的表达效率。 MS2 BS-lncRNA载体构建:将MS2 BS构建至...
MS2-P65-HSF1_GFP质粒来源是一个大肠杆菌表达载体,Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达,LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达,防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割,再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。 产品相册MS2-P65-HSF1_GFP质粒来源CTTTCCTGCGTTATCC...
GFP—MS2融合蛋白mRNA胞内定位RNA-蛋白相互作用Jum目的检测细胞中Jun mRNA在活细胞内的定位.方法设计引物,构建融合MS2茎环结构串联重复的Jun表达载体(pcDNA3.1-Jun-MS2-48X).转染细胞后,绿色荧光蛋白(GFP)-MS2融合蛋白可与MS2茎环串联重复结构结合,通过荧光显微镜观察GFP的细胞定位,能够间接确定Jun mRNA在细胞内的定位...
装位点序列),当MS2一GFP融合蛋白与靶RNA共表 合能阻止核糖体结合到复制酶的起始位点上,从而 达时,大量带有GFP标签的衣壳蛋白会与每个RNA 抑制复制酶的翻译,完成其对翻译的调节19。 。 分子上的包装位点序列结合,在显微镜下形成明亮 1.1 用于RNA病毒核酸检测的标准物质、校准品和 ...
》产品信息货号名称规格KL-ZL3279MS2-P65-HSF1_GFP哺乳编辑质粒3ug》产品描述别名:(Plasmid#61423) 原核抗性:氨苄青霉素...
英文名称:MS2-P65-HSF1_GFP哺乳编辑质粒 保质期:3个月/12个月以上 保存条件:-20℃/-80℃ 质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 电话:17317861055 QQ:570992151 收到质粒干粉后请先短暂离心,再加入20ul ddH2O 溶解质粒,然后转化进相应的感受态中,再挑取单菌落提取质粒(提供图谱 序列 测序报告 售后)暂时...
复结构结合,通过荧光显微镜观察GFP的细胞定位,能够间接确定JunmRNA在细胞内的定位。结果 成功构建 了pcDNA3.1一Jun—MS2-48X表达载体,经荧光显微镜观察,能够看到明显的绿色荧光,并且在细胞内聚集。结论 实现了在细胞内实时观察JunmRNA,为在单细胞水平上JunmRNA的定位提供了新的技术方法。 [关键词] GFP—MS2融合蛋白;...
Two-color timelapse movie to show the colocalization of oskMS2/MS2-GFP and RFP-Stau to the same moving particle. oskMS2/MS2-GFP is in green, RFP-Stau is in red. Due to the sequential imaging of the red and green channels, the two signals do not colocalize completely because of the...