mRFP-GFP-LC3是一种常用于研究自噬的双荧光蛋白标记物,可以用于评估自噬过程。以下是mRFP-GFP-LC3自噬评判标准: 自噬囊泡膜的形成:正常情况下,细胞内的mRFP-GFP-LC3表达时呈现为一个均匀分布的绿色荧光信号。当自噬过程发生时,mRFP-GFP-LC3会在囊泡膜上形成点状或环状的荧光信号。观察细胞中是否出现这些点状或环状...
▲单箭头:自噬小体;双箭头:自噬溶酶体; Part.02 双荧光穿梭质粒系统检测 自噬形成时,mRFP-GFP-LC3质粒转移至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色或黄色荧光斑点。 当自噬溶酶体形成后,酸性环境使GFP荧光淬灭,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶...
优点:mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株可以稳定持续的表达mRFP-EGFP-LC3,能够有效地解决瞬转实验的效率低、周期长、操作繁琐、不稳定等问题,有利于保证实验结果稳定性与可重复性。mRFP-GFP-LC3 双荧光自噬指示体系的出现,把自噬研究带入了一个新的阶段,自噬不再只是指标,而是一种机制,自噬流的顺畅与否,对于细胞生理功能的...
结论: 双荧光 mRFP-eGFP-LC3 体系优于单荧光 GFP-LC3 体系,更能全面完整地反映细胞自噬水平,能够反映 细胞内自噬流的变化,是自噬定量分析的可靠方法。 【期刊名称】贵阳医学院学报 【年(卷),期】2015(040)010 【总页数】4 【关键词】[关键词] 雷帕霉素; 自噬; 人胚肾细胞; LC3; 单荧光 GFP-LC3 质粒;...
LC3合成之后是前提LC3pro-LC3；然后立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽，暴露甘氨酸，这个是LC3-I，胞浆分布。自噬过程中，LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下（和泛素修饰过程很像），与磷脂酰乙醇胺共价结合，这个才是LC3-II，结合在自噬体膜上。LC-II由于磷脂酰乙醇胺的修饰，导致电荷的变化...
[关键词]雷帕霉素;自噬;人胚肾细胞;LC3;单荧光GFP—LC3质粒;双荧光mRFP—eGFP—LC3 [中图分类号]R34—33[文献标识码]A[文章编号]1000.2707(2015)10.1029-04 theEffectofDual-FluorescencemRFP·-eGFP-LC3in Evaluating Autophagy HUANG Bin,LIUBenrong,LIUShaojun Zhenjun,LIU InstituteCardiovascularSecond (Departmen...
优点:mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株可以稳定持续的表达mRFP-EGFP-LC3,能够有效地解决瞬转实验的效率低、周期长、操作繁琐、不稳定等问题,有利于保证实验结果稳定性与可重复性。 mRFP-GFP-LC3双荧光自噬指示体系的出现,把自噬研究带入了一个新的阶段,自噬不再只是指标,而是一种机制,自噬流的顺畅与否,对于细胞生理功能的...
目的:探讨双荧光mRFP-eGFP-LC3(ptfLC3)体系在细胞自噬中的作用.方法:采用不同浓度雷帕霉素(50,100,200,500,1 000 nmol/L)处理人胚肾细胞(HEK293),蛋白印迹法检测不同浓度雷帕霉素组中自噬标记蛋白(LC3蛋白)的表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值;单荧光GFP-LC3质粒和双荧光mRFP-eGFP-LC3质粒转染HEK293细胞,雷帕霉素...
mRFP-GFP-LC3腺病毒,mRFP用于标记与追踪LC3,GFP的减弱可指示 溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸 性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP荧光发生淬灭,此时只能检测 到红色荧光。这种串联的荧光蛋白表达载体系统直观清晰的指示了细
servicehanbionetwwwhanbionet自噬双标腺病毒mrfpgfplc3使用指南mrfpgfplc3串联荧光蛋白腺病毒中表达的gfp和mrfp用于标记及追踪lc3gfp的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体由gfp荧光蛋白对酸性敏感当自噬体与溶酶体融合后gfp荧光发生淬灭此时只能检测到红色荧光原理如下图所统计方法我们在显微镜成像后红绿荧光...