在RT-PCR中，AMV和MMLV是两种重要的反转录酶。它们分别来源于鸟类成髓细胞白血病病毒（amv）和鼠白血病病毒。AMV逆转录酶是从鸟类成髓细胞白血病病毒（amv）中提取的，具有双重活性：1.5' > 3'依赖引物的聚合酶活性，能够使用RNA或DNA作为模板；2.具有3' > 5'Rase H活性，能够降解RNA/DNA杂合体中...
逆转录酶包含多个功能域,分别为聚合酶域和RNase H域,其中聚合酶域进一步细分为“手指”、“手掌”和“拇指”三个亚域,分别参与模板结合、催化反应和结构支持[1]。在分子生物学中,尤其分子诊断领域,逆转录酶不可或缺。它可将病毒RNA基因组转为cDNA,再通过RT-qPCR、RT-LAMP、RNA测序等技术进行检测,这一特性使得对...
它可用于双脱氧法测定DNA或RNA的序列和以短的RNA为模板合成cDNA。 2M-MLV是鼠白血病病毒反转录酶，可...
在RT-PCR中提到的AMV、MMLV是什么?网友 1 最佳答案 回答者:网友 是两种反转录用的逆转录酶。下面分别介绍:1、AMV 逆转录酶从鸟类成髓细胞白血病病毒(amv)中分离出来的,它拥有双重活性:1.5' > 3'依赖引物的聚合酶活性,可以以RNA或DNA作为模板;2.具有3' > 5'Rase H 活性,可以降解RNA/DNA杂合体中的RNA,...
它可用于双脱氧法测定DNA或RNA的序列和以短的RNA为模板合成cDNA。2M-MLV是鼠白血病病毒反转录酶，可...
1、AMV 逆转录酶从鸟类成髓细胞白血病病毒（amv）中分离出来的，它拥有双重活性：1.5' > 3'依赖引物的聚合酶活性，可以以RNA或DNA作为模板；2.具有3' > 5'Rase H 活性，可以降解RNA/DNA杂合体中的RNA，它需要Mg2+或Mn2+激活。它可用于双脱氧法测定DNA或RNA的序列和以短的RNA为模板合成cDNA。
1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。 2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。 2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
5.与PCR兼容,RT产物可以用于PCR和real-timePCR。 6.能被金属螯合剂,无机磷酸,焦磷酸和多胺抑制。 7.RNaseH活性远低于AMV逆转录酶和野生型的MMLV逆转录酶。 规格及成分 成份50000U包装 MMLV逆转录酶(200U/μL)250uL RTBuffer,5X5mL 使用手册1份
1.模板RNA中是否含有基因组DNA,可在反应中用2.5UTaq酶替代RT/TaqMix来证实。 2.在37~40℃温浴15~30分钟,cDNA即可有效合成。建议在40℃温浴30分钟作为通常的起始 步骤。合适的逆转录温度要根据引物及模板的序列来决定。 3.对于不同的序列,PCR条件必须进一步优化,退火和延伸分开(三步循环)。 五、问题分析与解...