逆转录酶包含多个功能域,分别为聚合酶域和RNase H域,其中聚合酶域进一步细分为“手指”、“手掌”和“拇指”三个亚域,分别参与模板结合、催化反应和结构支持[1]。在分子生物学中,尤其分子诊断领域,逆转录酶不可或缺。它可将病毒RNA基因组转为cDN...
M-MLV(H-)是在M-MLV的基础上,对蛋白序列进行突变优化,进一步降低RNaseH活性。 应用示例: Q-PCR. EZassay M-MLV RT is as good as NEB counterpart ( M0368 ). M-MLV逆转录酶+RPA(or any types of 恒温扩增PCR) 可以实现RNA 边逆转录边扩增,简化操作,提高效率。 进一步引入Cas12a, 可实现RNA 边逆...
其次,RT利用未被RNase H去除的PPT作为引物进行DNA定向正链DNA合成。然后用RNase h去除PPT和tRNA引物,3'和5' ssDNA PBS区杂交形成环状的dsDNA中间体。RT对PBS和PPT末端进行链置换合成,产生一个钝端、线性的病毒基因组的dsDNA拷贝,包括两端的长末端重复序列(LTR...
逆转录酶包含多个功能域,分别为聚合酶域和RNase H域,其中聚合酶域进一步细分为“手指”、“手掌”和“拇指”三个亚域,分别参与模板结合、催化反应和结构支持[1]。在分子生物学中,尤其分子诊断领域,逆转录酶不可或缺。它可将病毒RNA基因组转为cDNA,再通过RT-qPCR、RT-LAMP、RNA测序等技术进行检测,这一特性使得对...
同时,靶序列由引物和探针双重控制,特异性好、假阳性低。 2、灵敏度高,荧光PCR检测技术是综合了PCR技术、荧光标记技术、激光技术、数码显象技术为一体的技术,因此它的检测灵敏度很高。3、线性关系好、线性范围宽,由于荧光信号的产生和每次扩增产物成一一对应的关系,通过荧光信号的检测可以直接对产物进行定量;定量范围...
RT体系/PCR体系20ul×50次/50ul×80次 BJ-PJ6448 产品介绍: 存储条件:-20℃保存一年。 制品说明: M-MLVⅢ 是通过基因重组技术改造,在大肠杆菌中表达纯化得到的高温反转录酶,去除RNaseH活性。可在37℃-55℃条件下合成一链cDNA,具有灵敏度高,特异性高,热稳定性高和半衰期长的特点。聚合能力强,具有更强的延伸...
5X M-MLV RT Buffer 2 RNase Inhibitor (40 U/μL) 0.25 M-MLV Reverse Transcriptase (H-) (200U/μL) 0.25~1 [1] RNase free ddH2O Up to 10 [1]当RNA起始模板量>500 ng时,M-MLV Reverse Transcriptase (H-)使用量应>0.25。 5. 轻轻混匀; 6. 如果以Oligo (dT)18或基因特异性引物(Gene ...
RT-PCR技术灵敏且用途广泛,可用于检测 细胞中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。我公司自主研发了一系列的RT-PCR相关产品,确 保您的实验顺利进行。 编号 原编号 品名 规格 价格 TER004 DH204-5 M-MLV Reverse transcriptase 10000U 250.00 ...
目标mRNA含有较强的转录中止子 RT反应可用随机引物代替OligodT, 适当提高RT反应的温度。 起始RNA量较少 增加RNA的量。对于小于50ng的RNA样品,可以在第一链cDNA合成中使用0.1μg-0.5μg乙酰BSA。 目的序列在分析的组织中不表达 尝试其他组织或样本 有非特异性条带 基因特异性引物设计较差 遵循用于扩增引物设计的同...
[0012]本发明的SuperRT逆转录酶序列如SEQ ID NO.1所示, 本发明的SuperRT逆转录酶的RNase H活性缺失, 减少了逆转录反应中RNA的降解, 并且酶的合成活性和热稳定性达到一个比较好的平衡。本发明的SuperRT逆转录酶具有高持续合成能力, 可对极少量RNA模板进行良好的逆转录反应; 抗抑制能力强, 可确保即使存在常见的...