我们提出了一个新的miRNA的定量的实时RT-PCR技术方案。它包括两个步骤:RT和实时PCR。首先,茎环RT引物是与miRNA分子杂交,然后用Multi-Scribe反转录。接下来,用传统的TaqMan PCR,对RT产品进行定量。 图1。上图描述的是TaqMan miRNA的检测原理,基于TaqMan实时定量miRNA的包括两个步骤,茎环RT和实时PCR。茎环RT引物结合...
miRNA-seq是为了检测miRNA的表达情况发展起来的高通量测序方法。由于miRNA的序列很短，因此建库时可以直接添加接头，进行逆转录扩增，通过PCR扩增并添加测序接头，然后纯化特定范围的DNA片段，进行上机测序，结合数据分析可以了解miRNA的表达情况（图4）。图4 miRNA测序实验流程图。文献案例 2023年6月，Wang等人在Frontiers ...
A new miRNA quantitation method hasbeen developed using stem-loop primers for reverse transcription (RT) followed by real-time TaqMan(R). A total of 240miRNA assays were designed and tested using as little as 0.03 ng total RNA or 2-3 heat-treated cells. The CT valuescorrelated (R2 = ...
SDF-1、CXCR4、ERK、Slit2、VEGF mRNA的表达 RT-qPCR检测microRNA 381、LRRC4、SDF-1、CXCR4、ERK、Slit2和VEGF在大鼠脑组织中的表达水平(图8)。与假手术组相比,其他各组microRNA 381表达及SDF-1、CXCR4、ERK、Slit2、VEGF mRNA...
茎环法逆转录使用特殊设计的茎环逆转录引物(Stem-loop RT Primer)进行逆转录,该引物由通用的茎环结构序列和6-8个miRNA 3’端反向互补碱基组成,通用的茎环结构不仅能有效地延长miRNA的逆转录产物长度,同时它自身互补的构象可以避免与其他同源基因结合,减少了非特异性扩增的几率。
确定好要研究的miRNA后可以通过构建过表达载体/沉默载体,结合稳定转化/瞬时转化实验来验证miRNA的生物学功能。另外,还可以通过生物信息学预测结合降解组测序、5' RLM-RACE、荧光定量PCR以及蛋白免疫印迹等实验确定miRNA的靶基因,并综合解析miRNA-靶基因-表型三者之间的调控关系。
miScript SYBR Green PCR Kit配合miScript PCR System的组件,灵敏和特异性的检测和定量miRNA。miScript PCR System灵敏度高、动态范围广。持续高的扩增效率,确保使用∆∆C T方法进行多个miRNAs表达分析结果的准确性。 miScript II RT Kit miScript II RT Kit配合miScript PCR System的其他组分,灵敏和特异性地检...
Exiqon miRCURY LNA™ Universal RT microRNA PCR芯片检测平台,基于LNA™专利技术,采用独特的Universal RT反应,实现对microRNA的准确定量检测,即使在总RNA含量较低的样本,如FFPE和血清/血浆中,也可以获得高质量的microRNA检测结果。 数谱生物为您提供Exiqon公司miRCURY LNA™ Universal RT microRNA PCR芯片——micro...
快速、简单、可放大—两步定量 RT-PCR 分析法可在3小时内产生高质量结果 我们的 TaqMan MicroRNA 分析试剂盒产品目录随着 Sanger 测序数据库持续更新,全面覆盖大部分当前注释基因。 检测试剂盒搜索工具 - 查找和购买最适合于您的单管 TaqMan 检测试剂盒: ...
Real-time quantification of microRNAs by stem-loop RT-PCR. Nucleic Acids Res. 2005; 33(20): e179. Doi: 10.1093/nar/gni178. 发布于 2022-11-11 16:07・IP 属地湖南 miRNA 荧光定量pcr 反转录 赞同11添加评论 分享喜欢收藏申请转载 ...