RT引物设计的概念可以应用在小分子RNA 来源于较大的发夹前体。miRNA是在动 1000个独特的转录产物,其中,在桑格中心 mRNA的翻译来调节基因表达。他们被认为具体 职责包括调节细胞增殖和新陈代谢,发育 microRNA的实时定量茎环RT-PCR技术 摘要: 已开发出一种新型的microRNA(miRNA)的定量方法,即利用茎环反转录,TaqmanPCR...
图1。上图描述的是TaqMan miRNA的检测原理,基于TaqMan实时定量miRNA的包括两个步骤,茎环RT和实时PCR。茎环RT引物结合在miRNA分子的3'端和用反转录酶逆转录。然后,RT产品使用传统的TaqMan PCR定量,其中包括特定miRNA的正向引物,反向引物和染料标记的TaqMan探针。尾正向引物5'的作用是根据miRNA分子的序列组成增加其熔融...
miRNA-seq是为了检测miRNA的表达情况发展起来的高通量测序方法。由于miRNA的序列很短,因此建库时可以直接添加接头,进行逆转录扩增,通过PCR扩增并添加测序接头,然后纯化特定范围的DNA片段,进行上机测序,结合数据分析可以了解miRNA的表达情况(图4)。图4 miRNA测序实验流程图。文献案例 2023年6月,Wang等人在Frontiers ...
Exiqon miRCURY LNA™ Universal RT microRNA PCR芯片检测平台,基于LNA™专利技术,采用独特的Universal RT反应,实现对microRNA的准确定量检测,即使在总RNA含量较低的样本,如FFPE和血清/血浆中,也可以获得高质量的microRNA检测结果。 数谱生物为您提供Exiqon公司miRCURY LNA™ Universal RT microRNA PCR芯片——micro...
Exiqon microRNA PCR芯片是准确检测血清/血浆中microRNA的必备利器 •超强的分辨能力,能区分只有单碱基的差异的microRNA •提高灵敏度,降低背景噪音,精确检测血清/血浆中microRNA(图2) 独特的Universal RT反应 一次逆转录反应(RT)就能将芯片内所有的microRNA转录成cDNA,从而实现: ...
苹果MicroRNA的茎环RT-PCR检测及离体试管苗与田间苗表达差异
确定好要研究的miRNA后可以通过构建过表达载体/沉默载体,结合稳定转化/瞬时转化实验来验证miRNA的生物学功能。另外,还可以通过生物信息学预测结合降解组测序、5' RLM-RACE、荧光定量PCR以及蛋白免疫印迹等实验确定miRNA的靶基因,并综合解析miRNA-靶基因-表型三者之间的调控关系。
mRNA PCR芯片 NuRNA™ tRNA Modification Enzymes PCR芯片 NuRNA™ Small RNA Biogenesis-Related Proteins PCR芯片 NuRNA™ Human Central Metabolism PCR芯片 NuRNA™ Human Epitranscriptomics PCR芯片 实时定量PCR试剂 rtStar™ Pre-designed Functional LncRNA Primer Sets miRStar™ Pre-designed miRNA-sp...
研究人员推测FEXO功能受损可能是由于miRNA水平改变引起的,于是使用PCR microarrays对84种报道较多的miRNA进行了检测,比较了NEXO和FEXO的miRNA成分。实验发现两组外泌体中均有23个miRNAs表达差异。其中,与NEXO中的表达相比,miR-21-5p在FEXO中失调最多(...
(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、神经生长因子(NGF)和神经突生长抑制因子-A(Nogo-A)等,逆转录定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和免疫印迹用于评价m...