#MeRIP #RTqPCR试剂盒 MeRIP RT-qPCR试剂盒是基于CUT&RUN技术开发,非常适合以纯化的RNA或mRNA为输入材料,独特优化的试剂针对富集后得到pg~ng级别的mRNA,仍可进行逆转录,采用EvaGreen qPCR PreMix,可进行实时荧光定量qPCR分析定量检测。 5 2 1 发布时间:2023-09-24 19:51 ...
与普通qPCR检测基因表达时能找到稳定表达的看家基因不同,MeRIP-qPCR没有一个稳定修饰的基因做参照,目前RNA修饰文章也不要求有这种参照。不过也可做IgG对照检测体系的特异性。 因此,在云序生物的GenSeq m6A MeRIP试剂盒中,我们贴心的为客户提供了IgG抗体以及m6A的一对阳参引物和一对阴参引物(根据文献报道:靶向 HEK29...
6、本试剂盒适配下游RT-qPCR以及特定甲基化的全转录组测序。 第一部分:背景简介 RNA转录后修饰 RNA修饰开始被认为仅仅是RNA在核酸结构上的化学微调,随着前沿研究技术的发展以及相关抗体的出现,当前发现RNA修饰在转录组水平广泛存在,并且是可逆的动态调控状态,参与生物进程的多方面,包括:细胞分化、性别决定、肿瘤的发生...
6、本试剂盒适配下游RT-qPCR以及特定甲基化的全转录组测序。 第一部分:背景简介 RNA转录后修饰 RNA修饰开始被认为仅仅是RNA在核酸结构上的化学微调,随着前沿研究技术的发展以及相关抗体的出现,当前发现RNA修饰在转录组水平广泛存在,并且是可逆的动态调控状态,参与生物进程的多方面,包括:细胞分化、性别决定、肿瘤的发生...
图1:GenSeq® m6A MeRIP试剂盒实验流程 结果展示 图2. MeRIP-qPCR检测结果:Input%分析 图3. MeRIP-qPCR检测结果:Fold Enrichment分析 图4. MeRIP-qPCR检测结果:信噪比优于采用游离m6A洗脱的传统流程 图5. MeRIP-Seq结果展示:IGV可视化 图6. MeRIP-Seq结果展示:Motif分析 ...
主要试剂 主要仪器及器材 二、蛋白与RNA信息 抗体信息: Anti-N6-methyladenosine (m6A)抗体 三、实验步骤 (一)RNA提取 1. 样本前处理:收集 1×10^7细胞后,用预冷的 1×PBS漂洗两次,1000 rpm 室温离心 5 min,去上清; 2. 向细胞中加入 1 mL Trizol 裂解,吹打至完全看不到细胞团块,室温放置 5 min; ...
2. 试剂盒中的 Positive Primers 和 Negative Primers 是什么? Re:是根据文献选择的,靶向 HEK293 细胞中 m6A 修饰的某段 RNA 区域(Positive Primers) 和无 m6A 修饰的某段 RNA 区域(Negative Primers)的 PCR 引物.可用于 RT-qPCR 验证实 验效率和特异性.需要注意的是:m6A 修饰和 RNA 的表达,具有很强...
图1:m6A MeRIP试剂盒实验流程 结果展示 图2. MeRIP-qPCR检测结果:Input%分析 图3. MeRIP-qPCR检测结果:Fold Enrichment分析 图4. MeRIP-qPCR检测结果:信噪比优于采用游离m6A洗脱的传统流程 图5. MeRIP-Seq结果展示:IGV可视化 图6. MeRIP-Seq结果展示:Motif分析 ...
用超纯RNA提取试剂盒(DNaseⅠ)提取细胞RNA,Magna MeRIP^(TM)m^(6)A Kit试剂盒富集甲基化修饰片段,并通过RT-qPCR检测m^(6)A甲基化修饰的RNA区域;采用蛋白免疫印迹实验(Western blot)和逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测细胞中WTAP,KDM4B蛋白和mRNA的表达水平.采用克隆形成实验检测细胞体外克隆形成能力.结果:...
选用超过 25 株经 TDE 编辑的 GhECA1 以及超过 30 株经 TME 编辑的 GhECA1 的 T0 代植物用于转录水平分析,通过 RT-qPCR 检测发现 dCas13(Rx)基因在这些转基因植物中转录情况良好,但不同编辑的单子叶植物间存在差异(图 3d)。鉴于传统评估 m6A 修饰方法存在缺乏单核苷酸分辨或定量能力不足,研究采用 SELECT ...