目的:探讨干细胞相关因子Notch3在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞对顺铂化疗敏感性中的作用。方法:用Lipofectamine2000试剂转染乳腺癌MDA-MB-231细胞并用G418筛选稳定转染细胞系,根据转染质粒不同分为MDA-MB-231-PCLE组(对照组)和MDA-MB-231-N3ICD组(过表达Notch3组),应用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测不同组...
原代培养的胰岛内皮细胞用抗G418的温度敏感型SV40大T抗原(tsA-58-3)转染。抗性克隆用克隆环分离,并筛选吸收dil-Ac-LDL的。这株细胞保留了内皮细胞的许多特性,如吸收乙酰化LDL和表达八因子相关抗原及BEGF受体。;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明...
细胞经侵染72 倒置荧光显微镜(80i,Nikon, 日本)观察, 入G418进行筛选, 扩大培养。 1畅4 自发性肺转移模型的建立 MDAMB231GFP 细胞用胰酶消化, min-1 离心5 min, 用生理盐水或0畅01mol-1的磷酸盐缓冲液(PBS) 重悬制备单细胞悬液, 将细胞调整到 mL-1 每只Balb/C裸鼠于左前肢腋下接种1畅5 个细胞。每隔...
目的 构建能稳定表达荧光素酶和绿色荧光蛋白的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系以建立可用于活体成像的三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤模型.方法 采用磷酸钙共沉淀的方法构建表达荧光素酶和绿色荧光蛋白的慢病毒载体,体外感染MDA-MB-231细胞...
细胞经侵染72 h后,倒置荧光显微镜(80i,Nikon,日本)观察,加入G418进行筛选,扩大培养。 1.4自发性肺转移模型的建立MDA-MB-231-GFP细胞用胰酶消化,1 000 r·min-1离心5 min,用生理盐水或0.01mol·L-1的磷酸盐缓冲液(PBS)重悬制备单细胞悬液,将细胞调整到1.5×107 mL-1。每只Balb/C裸鼠于左前肢腋下接种1.5...
MCF-7的形态比较正常，231的细胞梭行较多，另外你可以根据贴壁鉴别，MCF-7贴壁不牢，经胰酶消化，很...
方法: (1)利用转染技术,通过脂质体把N-乙酰氨基半乳糖转移酶6的RNA干扰质粒Pgpu6/GFP/Neo-GALNT6和对照载体转入乳腺癌细胞MDA-MB-231中,经过抗性药物筛选(G418),构建GALNT6低表达的MDA-MB-231稳定细胞株. (2)分别采用实时荧光定量PCR(SYBR Green法)检测GALNT6目的基因mRNA表达,Western Blot检测目的蛋白的表达,...
最近用DMEM高糖培养基养的MDA-MB-231细胞，在显微镜下看到背景沙沙的，有没有大神知道原因 应该是支原体...
目的:探讨干细胞相关因子Notch3在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞对顺铂化疗敏感性中的作用.方法:用Lipofectamine2000试剂转染乳腺癌MDA-MB-231细胞并用G418筛选稳定转染细胞系,根据转染质粒不同分为MDA-MB-231-PCLE组(对照组)和MDA-MB-231-N3ICD组(过表达Notch3组),应用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测不同组...
目的:观察MRP-1/CD9对高转移人乳腺癌细胞系MDA-MB-231体外增殖和侵袭的抑制效应,并初步探讨其作用机制.方法:应用MRP-1/CD9特异性扩增引物,借助RT-PCR获得MRP-1/CD9全长cDNA片段,正向插入pcDNA3.1表达载体中,并将重组质粒导入MDA-MB-231细胞中,G418稳定筛选;应用CFSE-流式细胞仪检测,单层伤口愈合实验,软琼脂克...