简介 斑点杂交(dotblot)是一种检测,分析和鉴定 dna,rna和蛋白质的技术,通过显影斑点的有无及颜色的深浅来判断是否有杂交及其杂交强度.作为目前高等真核生物和植物中最丰富的一种 rna转录后修饰,m 6 a修饰能够调控 rna的剪接与转运,稳定性,出核和翻译成蛋白质的效率.因此在...
m6a dot blot原理 其核心在于识别和定量分析 m6A 修饰的核酸分子。首先需要提取含有 m6A 修饰的核酸样品。然后将核酸样品点样于膜上。利用特异性抗体与 m6A 结合。抗体能够特异性识别 m6A 修饰位点。这种结合具有高度的选择性。之后通过显色或发光反应来检测结合情况。检测信号的强度反映了 m6A 修饰的水平。 膜的...
总结而言,目前已经开发出的不同层面m6A修饰检测方法主要有: 1)整体水平检测:TLC、Dot-blot和LC-MS/MS; 2)转录组范围内m6A修饰高通量检测(图1): 基于特异性抗体的测序技术(MeRIP-seq/m6A-seq、m6A-seq2、m6A-CLIP/miCLIP); 非抗体依赖的测序技术(m6A-SEAL-seq、m6A-SAC-Seq、Nanopore Direct RNA Seq、GLORI...
1)整体水平检测:TLC、Dot-blot和LC-MS/MS; 2)转录组范围内m6A修饰高通量检测(图1): a)基于特异性抗体的测序技术(MeRIP-seq/m6A-seq、m6A-seq2、m6A-CLIP/miCLIP); b)非抗体依赖的测序技术(m6A-SEAL-seq、m6A-SAC-Seq、Nanopore Direct RNA Seq、GLORI-Seq); 3)单基因m6A位点检测技术:MeRIP-qRT-PCR、...
随后利用dot blot法检测整体m6A甲基化水平,结果揭示黑色素瘤细胞中的m6A甲基化水平低于正常黑色素细胞,这与黑色素瘤中的其他m6A发现一致。研究发现经LBH589处理后,眼部黑色素瘤细胞中的整体m6A甲基化增加,表明HDAC抑制可恢复眼部黑色素瘤中m6A甲基化水平。
1)整体水平检测:TLC、Dot-blot和LC-MS/MS; 2)转录组范围内m6A修饰高通量检测(图1): 基于特异性抗体的测序技术(MeRIP-seq/m6A-seq、m6A-seq2、m6A-CLIP/miCLIP);非抗体依赖的测序技术(m6A-SEAL-seq、m6A-SAC-Seq、Nanopore Direct RNA Seq、GLORI-Seq); ...
随后利用dot blot法检测整体m⁶A甲基化水平,结果揭示黑色素瘤细胞中的m⁶A甲基化水平低于正常黑色素细胞,这与黑色素瘤中的其他m⁶A发现一致。研究发现经LBH589处理后,眼部黑色素瘤细胞中的整体m⁶A甲基化增加,表明HDAC抑制可恢复眼部黑色素瘤中m⁶A甲基化水平。 随后,作者探索了LBH589诱导m⁶A甲基化...
随后利用dot blot法检测整体m6A甲基化水平,结果揭示黑色素瘤细胞中的m6A甲基化水平低于正常黑色素细胞,这与黑色素瘤中的其他m6A发现一致。研究发现经LBH589处理后,眼部黑色素瘤细胞中的整体m6A甲基化增加,表明HDAC抑制可恢复眼部黑色素瘤中m6A甲基化水平。
1)整体水平检测:TLC、Dot-blot和LC-MS/MS; 2)转录组范围内m6A修饰高通量检测(图1): a)基于特异性抗体的测序技术(MeRIP-seq/m6A-seq、m6A-seq2、m6A-CLIP/miCLIP); b)非抗体依赖的测序技术(m6A-SEAL-seq、m6A-SAC-Seq、Nanopore Direct RNA Seq、GLORI-Seq); ...
该研究首先利用斑点杂交(Dot blot)和高效液相色谱串联质谱 (HPLC-MS/MS) 实验发现Bt Cry1Ac抗性小菜蛾中肠组织的m6A修饰水平显著升高(图1)。 图1. m6A修饰水平在Bt抗性和Bt诱导敏感种群中显著升高 为了进一步探索Bt Cry1Ac抗性小菜蛾中肠组织的m6A修饰水平显著升高的分子机制,作者克隆了小菜蛾中7个m6A甲基转移酶...