此外,通过LUC(荧光素酶报告基因)实验进一步验证了BdbZIP62与NtNCED1启动子的相互作用,以及BdGF4a对结合的影响。结果显示BdbZIP62能激活pNtNECD1-LUC,并且相比单独表达pGreenII 62-SK-BdbZIP62,共表达pGreenII 62-SK-BdGF14a和带pNtNECD1-LUC的pGreenII 62-SK-BdbZIP62导致更高的LUC/REN比率,这表明,类似于N...
luc双荧光素酶是一种催化荧光发光的酶,其底物是双荧光素(luciferin)。当双荧光素与luc双荧光素酶结合时,酶催化荧光素氧化反应,产生光和二氧化碳。这个反应需要三个物质:双荧光素、luc双荧光素酶和三磷酸腺苷(ATP)。当这三个物质在合适的条件下混合时,就会发生发光反应。 3. luc双荧光素酶在烟草中的应用 3.1 ...
原理:一个载体上有两个报告基因,一个是LUC基因(萤火虫荧光素酶),一个是RLUC(海参荧光素酶),萤火虫荧光素酶由待检测的启动子调控,如果目标蛋白能够与该启动子结合,与对照蛋白相比就能够调控LUC的荧光强度。RLUC由35S启动子调控,该启动子不受目标蛋白影响,RLUC的强度作为内参均一化LUC的强度,用于去除因叶片...
烟草瞬时转化实验选用融合Luc信号的pCAMBIA 1381Z-Luc载体,载体构建过程是将拟南芥及菊花的FT启动子分别采用双切双连的常规载体构建方式将启动子构建到pCAMBIA 1381Z-Luc载体上,同时将目的基因构建到pMDC43或pMDC32或pORE载体上作为超表达载体进行后续的瞬时转化实验。 通过农杆菌转化的方式,将上述构建好的质粒转化到农...
酰5-6周本氏烟草等二、体构建及杆菌化载农转烟草瞬化用融合时转实验选Luc信号的pCAMBIA 1381Z-Luc体,体构建程是将南载载过拟芥及菊花的FT启子分别采用双切双的常体动连规载构建方式将启子构建到动pCAMBIA 1381Z-Luc载体上,同将目的基因构建到时pMDC43或pMDC32或pORE体上作超表达体行后的瞬化载为载进续时...
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在这篇Bio-protocol文章中,来自中国科学院上海植物逆境生物学研究中心Alberto Macho研究组的研究人员以农杆菌对本氏烟进行瞬时转化为例,为我们带来分裂荧光素酶互补成像(Split-LUC imaging)的试验方法。 亮点 1. 分裂荧光素酶互补成像是一种比较简单、快速的蛋白质互作体内检测方法; ...
（c）烟草叶片中共表达以上载体的相对LUC:REN比值(Zhong et al., 2018)。没想到吧，一个双荧光素酶实验稍微改进一下居然可以做这么多实验，信号通路不知不觉就被打通了，哈哈！当然这里说的稍微夸张了一点，但信号通路确实也就是由这样的实验一个一个串起来的。所以，实验说难也难，说不难也不难，一旦领悟了...
科研干货:以烟草为材料进行Dual Luciferase Reporter的实验方法 原理:一个载体上有两个报告基因,一个是LUC基因(萤火虫荧光素酶),一个是RLUC(海参荧光素酶),萤火虫荧光素酶由待检测的启动子调控,如果目标蛋白能够与该启动子结合,与对照蛋白相比就能够调控LUC的荧光强度。RLUC由35S启动子调控,该启动子不受目标蛋白影响...
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