此外,通过LUC(荧光素酶报告基因)实验进一步验证了BdbZIP62与NtNCED1启动子的相互作用,以及BdGF4a对结合的影响。结果显示BdbZIP62能激活pNtNECD1-LUC,并且相比单独表达pGreenII 62-SK-BdbZIP62,共表达pGreenII 62-SK-BdGF14a和带pNtNECD1-LUC的pGreenII 62-SK-BdbZIP62导致更高的LUC/REN比率,这表明,类似于N...
原理:一个载体上有两个报告基因,一个是LUC基因(萤火虫荧光素酶),一个是RLUC(海参荧光素酶),萤火虫荧光素酶由待检测的启动子调控,如果目标蛋白能够与该启动子结合,与对照蛋白相比就能够调控LUC的荧光强度。RLUC由35S启动子调控,该启动子不受目标蛋白影响,RLUC的强度作为内参均一化LUC的强度,用于去除因叶片...
luc双荧光素酶被广泛用于研究基因表达。研究人员可以将luc双荧光素酶基因导入烟草细胞中,使其与目标基因连接在一起。当目标基因表达时,luc双荧光素酶也会被表达出来,从而产生荧光信号。通过测量荧光信号的强度,可以间接地了解目标基因的表达水平。 3.2 转基因研究 luc双荧光素酶在转基因研究中也扮演着重要角色。研究...
酰5-6周本氏烟草等二、体构建及杆菌化载农转烟草瞬化用融合时转实验选Luc信号的pCAMBIA 1381Z-Luc体,体构建程是将南载载过拟芥及菊花的FT启子分别采用双切双的常体动连规载构建方式将启子构建到动pCAMBIA 1381Z-Luc载体上,同将目的基因构建到时pMDC43或pMDC32或pORE体上作超表达体行后的瞬化载为载进续时...
烟草瞬时转化实验步骤烟草叶片瞬时转化实验 试验方法 一、实验材料及药品 pCAMBIA 1381Z-Luc载体、Gv3101农杆菌菌株及其感受态、MES、MgCl2、乙酰丁香通、5-6周本氏烟草等 二、载体构建及农杆菌转化 烟草瞬时转化实验选用融合Luc信号的pCAMBIA 1381Z-Luc载体,载体构建过程是将拟南芥及菊花的FT启动子分别采用双切双连的...
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在这篇Bio-protocol文章中,来自中国科学院上海植物逆境生物学研究中心Alberto Macho研究组的研究人员以农杆菌对本氏烟进行瞬时转化为例,为我们带来分裂荧光素酶互补成像(Split-LUC imaging)的试验方法。 亮点 1. 分裂荧光素酶互补成像是一种比较简单、快速的蛋白质互作体内检测方法; ...
（c）烟草叶片中共表达以上载体的相对LUC:REN比值(Zhong et al., 2018)。没想到吧，一个双荧光素酶实验稍微改进一下居然可以做这么多实验，信号通路不知不觉就被打通了，哈哈！当然这里说的稍微夸张了一点，但信号通路确实也就是由这样的实验一个一个串起来的。所以，实验说难也难，说不难也不难，一旦领悟了...
科研干货:以烟草为材料进行Dual Luciferase Reporter的实验方法 原理:一个载体上有两个报告基因,一个是LUC基因(萤火虫荧光素酶),一个是RLUC(海参荧光素酶),萤火虫荧光素酶由待检测的启动子调控,如果目标蛋白能够与该启动子结合,与对照蛋白相比就能够调控LUC的荧光强度。RLUC由35S启动子调控,该启动子不受目标蛋白影响...
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