时间蛋白质组分析显示,在LPS刺激的0-24小时内,THP-1细胞发生促炎反应。在LPS刺激后的不同时间点(0、2、4、6、12和24小时)收集细胞裂解液进行蛋白质组学分析,发现在LPS刺激的时间过程中,共有311个蛋白被大量改变。时间蛋白组研...
【结果】LPS刺激的THP-1细胞经水杨酸钠处理后,AMPK激活、凋亡增加、增殖减少、TNF-α和IL-1β分泌增加。AMPK抑制剂CompoundC可逆转上述效应。AMPK激活后可抑制LPS诱导的信号转导及转录激活因子3(STAT3)磷酸化,CompoundC可逆转激活的AMPK对STAT3的作用。【结论】AMPK激活对水杨酸钠调节的炎症反应发挥重要作用,包括诱导...
方法用PMA和/或IFN-γ诱导不同分化和活化状态的THP1/CD14细胞,以不同浓度人MBL预处理2 h后再用光滑型LPS刺激24h.收集培养上清,以ELISA从蛋白水平分析其TNF-α和IL-12 p40+p70的产生。收集细胞提取总RNA,以RT-PCR从转录水平评估TNF-α和IL-12的表达。 结果ELISA检测发现,LPS可刺激各组细胞分泌TNF-α和IL-12...
我用1ug/ML 的LPS (sigma)刺激THP-1细胞,24小时后取上清用BD公司CBA检测TH1/TH2/细胞因子谱,居然都是接近零。 重复一次 LPS浓度( 0,10ng,100ng,1000ng,10ug,20ug,50ug) / ml,孵育细胞24小时,取上清上机,结果仍然没有。 这是我准备做炎症细胞模型的,现在没法进行,请好心人指点。
目的:探讨血必净注射液对LPS刺激THP-1细胞诱导产生TNF-α、IL-1和IL-6的影响。方法:THP-1细胞先给以不同浓度LPS(0.1,1,5mg/...
目的探讨细菌脂多糖(LPS)对巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及共刺激分子表达的影响.方法培养THP-1,RAW264.7细胞,予100,200,1000μg/L LPS刺激24 h,CCK8法检测细胞增殖的变化;流式细胞术检测细胞凋亡情况;免疫印迹法检测培养上清以及细胞内HMGB1的水平;定量聚合酶链反应(Q-PCR)检测细胞内HMGB1转录水平;流式细胞...
目的:探讨血必净注射液对LPS刺激THP-1细胞诱导产生TNF-α,IL-1和IL-6的影响.方法:THP-1细胞先给以不同浓度LPS(0.1,1,5mg/L)刺激,再用不同浓度的血必净(3.125,12.5,50mg/mL)作用.用ELISA法测定上清液中'TNF-α,IL-1和IL-6表达的变化.结果:不同剂量LPS刺激THP-1细胞在不同浓度血必净作用下,其TNF-α表达...
目的:旨在探讨水杨酸钠激活AMPK通路对LP S诱导的人单核细胞THP-1炎症样反应的影响及机制. 方法:培养THP-1细胞,分别给予或不给予10ug/ml LPS和5mM水杨酸钠刺激THP-1,静置培养24h.用western blot方法测定Bcl-2蛋白,流式细胞仪检测Annexin V/PI染色,比较细胞凋亡变化.用western blot方法测定增殖细胞核抗原(PCNA)...