原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应.蛋白质中含有代酚基的酪氨酸,故有此反应.Folin---酚法的灵敏度是双缩脲法的100倍. 试剂:一:1,4%碳酸钠;2,0.2N氢氧化钠;3,1%硫酸铜;4,2%酒石酸钾钠.1和2等体积混合,3和4等体积混合,然后将两液以50:1混合(甲).当天使用.二:...
Lowry法,也被称为Folin-酚法,是一种广泛应用于生物化学领域的蛋白质测定方法。这种方法基于蛋白质在碱性条件下与铜结合生成复合物的原理,随后加入Folin-酚试剂,使蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基将磷钼酸盐-磷钨酸盐还原,产生深蓝色的钼兰和钨兰混合物。蓝色的深度与蛋白质的量成正相关,因此可...
🌱 实验原理:Lowry法(Folin-酚试剂法)是蛋白质测定的经典方法,其原理基于双缩脲反应的进一步发展。在碱性溶液中,铜-蛋白质复合物形成,随后被Folin-酚试剂中的磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色的钼蓝和钨蓝混合物。蓝色深度与蛋白质量成正比,从而可定量测定蛋白质含量。🌟 实验特点: 灵敏度高:Lowry法比双缩...
Lowry 法的显色原理是根据双缩脲反应,蛋白质中的肽键在碱性条件下与Cu2+反应,生成紫红色Cu+复合物。Folin-酚试剂在Cu+的催化下,磷钼酸磷钨酸盐被蛋白质中的芳香族氨基酸残基还原,产生深蓝色的钼蓝和钨蓝混合物,其最大吸收峰在745~750nm处。在一定的浓度范围内,所形成蓝色的深浅与蛋白质含量之间有线性关系,...
1、掌握Lowry法测定蛋白质浓度的原理和标准曲线的绘制。 2、掌握分光光度计的基本原理及相关操作。 二、实验原理 蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu2+螯合,形成蛋白质-铜复合物,与铜络合的蛋白质中所含的酪氨酸和色氨酸残基,使磷钼酸-磷钨酸(Folin-酚试剂)还原,产生蓝色化合物,在一定条件下,利用蓝色深浅与蛋白质...
Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量 一、实验目的 1、了解测定蛋白质的常用方法 2、掌握蛋白质含量测定的经典Lowry–Folin法。 二、实验原理 在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比...
Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度 [目的] 掌握Lowry法测定蛋白质浓度的原理。 [原理] 蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu2+螯合,形成蛋白质一铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,在一定条件下,利用蓝色深浅与蛋白质浓度的线性关系作标准曲线并测定样品中蛋白质的浓度。 [操作] 取试管7支...
Folin-酚试剂(Folin-phenolreagent)的显色原理主要是:试剂中的磷钼酸-磷钨酸混合物被蛋白质还原,形成多种还原型的混合酸,并且有特殊的蓝色。包括两步反应。㈠试剂甲使蛋白质发生烯醇化反应,在碱性条件下,形成蛋白质-铜络合物,从而使电子转移到混合酸中,大大地增强了酚试剂对蛋白质的敏感性。㈡...