Lowry法 20~250ug灵敏度高 缺点操作复杂,费时 灵敏度低干扰物较多不同蛋白质测定时有较大的偏差灵敏度低 干扰物质多、费时、操作严格计时 选择测定方法时应考虑 1、实验对测定所要求的灵敏度和精确度;2、蛋白质的性质;3、溶液中存在的干扰物质;4、测定所花费的时间等。Lowry’s法(Folin-酚试剂法)测定...
实验Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度 一、实验目的 1、掌握Lowry法测定蛋白质浓度的原理和标准曲线的绘制。 2、掌握分光光度计的基本原理及相关操作。 二、实验原理 蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu2+螯合,形成蛋白质-铜复合物,与铜络合的蛋白质中所含的酪氨酸和色氨酸残基,使磷钼酸-磷钨酸(Folin-酚...
样品测定:(1)取1毫升样品溶液(约含20-250微克多肽或蛋白质)加入5毫升试剂甲混匀,于室温放置10分钟。(2)加入0.5毫升试剂乙(folin—酚),立即摇匀,于室温保温30分钟;然后500nm(根据使用情况)处比色,以1毫升水代替样品作空白对照。测定后,可以从标准曲线中查出未知样品浓度。若用0.5厘米光程的比色...
Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。原理 此法的显色原理与双缩脲法是相同的,只是加入了第二...
Folin(福林)-酚试剂法(Lowry法)此方法由Lowry于1951年建立,是目前应用最多、最广、研究最深入的蛋白质含量测定方法。一、原理本法是双缩脲反应的发展,它结合了双缩脲法中铜盐反应和Folin试剂反应的特点。试剂甲相当于双缩脲试剂,可与蛋白质中的肽键起显色反应;试剂乙在碱性条件下极不稳定,易被酚类化合物还原...
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量(Lowry基本法)一目的与要求 掌握Folin-酚试剂法测定蛋白质含量的原理和方法。二实验原理 Folin-酚试剂(Folin-phenolreagent)的显色原理主要是:试剂中的磷钼酸-磷钨酸混合物被蛋白质还原,形成多种还原型的混合酸,并且有特殊的蓝色。包括两步反应。㈠试剂甲使蛋白质发生烯醇化...
Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度 [目的] 掌握Lowry法测定蛋白质浓度的原理。 [原理] 蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu2+螯合,形成蛋白质一铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,在一定条件下,利用蓝色深浅与蛋白质浓度的线性关系作标准曲线并测定样品中蛋白质的浓度。 [操作] 取试管7支...
folin酚法是一种常用于测定蛋白质含量的方法,也被称为Lowry方法。该方法通过将蛋白质与酸性铜离子、碱性染料和碱性钠离子反应,形成紫色复合物,再通过比色法测定复合物的吸光度,从而计算出蛋白质的含量。 folin酚法的优点在于灵敏度高、稳定性好、反应时间短、适用范围广,被广泛应用于生物化学、分子生物学、药学等领...
Folin-酚试剂法,也称检测法,最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤,以往在生物化学领域中广泛应用。 1.Lowry法原理 Lowry 法的显色原理是根据双缩脲反应,蛋白质中的肽键在碱性条件下与Cu2+反应,生成紫红色Cu+复合物。Folin-酚试剂在Cu+的催化下,磷钼酸磷钨酸盐被蛋白质中的芳香族氨基酸残基还原,产生深蓝色...