LFD-RPA技术原理如下: 1.使用下游引物进行标记,该引物具有5'-生物素标记,并与标记的nfo探针一起形成带有双标记的扩增产物。 2.这些扩增产物被加样垫上包被有抗FAM特异性抗体的胶体金颗粒捕获,并在向前层析的过程中与测试线上包被的链霉亲和素结合,从而在侧流层析试纸条上出现阳性测试条带。 3.控制线上包被抗兔...
重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术是一种在恒温条件下进行短时(5~20min)反应就可以扩增出靶标片段的核酸扩增技术,具有快速、灵敏、特异性高、操作简便等特点,已经成功应用于多种病原真菌、细菌、病毒和线虫等的检测。...
为建立一种高效、快速、简便的十足目虹彩病毒1(DIV1)检测方法,本研究以DIV1 ATPase基因为检测靶标,设计特异性引物和探针,采用方阵法优化反应温度和时间,结果显示,重组酶聚合酶扩增技术(RPA)最优反应温度为37℃,时间为15min,结果观察时...
公司 44245专利代理师 高宁馨(51)Int.Cl.C12Q 1/689 (2018.01)C12Q 1/6844 (2018.01)C12N 15/11 (2006.01)C12R 1/01 (2006.01) (54)发明名称应用LFD-RPA技术检测菠萝泛菌的引物、探针、试剂盒及其应用(57)摘要本发明公开了一种应用LFD‑RPA技术检测菠萝泛菌的引物、探针、试剂盒及其应用,属于生物技术...
摘要:本文对RPA-LFD这一新型核酸检测方法的技术原理、研究现状、技术瓶颈及用于现场核酸提取的研究进展进行综述。 重组酶聚合酶扩增技术(recombinase ploymerase amplication,RPA)是一种新型恒温核酸扩增技术,与PCR相比,操作简便,反应快速,灵敏度高,特异性强,无需精密仪器,是一种可以替代PCR 的核酸检测技术,被认为是目...
本发明属于病原微生物检测,涉及重组酶聚合酶扩增(recombinaseploymeraseamplication,rpa)技术和侧向流动试纸条(lateral flow dipstick,lfd)检测技术,联合2种技术设计试剂盒用于快速检测水稻植株、水稻种子、土壤等环境中的稻黄单孢菌(xanthomonas oryzae pv.oryzae,xoo),属于植物病害流行学、动态监测及预警的。
技术(recombinase polymerase amplification, RPA)和测流层析试纸条(lateral flow dipstick, LFD)相结合,建立一种操作便捷,反应快速,结果可视化,可同时 检测 MG,MS 两种病原的快速检测方法.【方法】基于 MG 的 mgc2 基因,MS 的 vlhA 基因设计特异性引物和探针,优化反应时 间,反应温度及引物配比建立双重 LFD-RPA ...
本发明公开了一种LFD‑RPA可视化快速检测曼氏血吸虫核酸的引物、探针、试剂盒及方法,引物序列如SEQIDNO.1～2所示,探针序列如SEQIDNO.3所示。本发明以曼氏血吸虫COX1(SmCOX1)基因为靶序列设计了RPA引物及探针,并采用RPA扩增技术结合侧流层析引流试纸条法,实现了曼氏血吸虫核酸的敏感、快速可视化检测,对曼氏血吸虫基因...
23、本发明利用双重rpa-lfd技术制备核酸快速检测试剂盒,在lfd层析作用下,扩增产物与标记在试纸条上的对应抗体结合,发生抗原抗体免疫反应,达到更好的肉眼识别效果。能在同一试纸条同时检测羊口疮病毒和羊痘病毒,在20分钟内完成检测,不需要大型仪器,只需要一个水浴锅。本发明可满足基层临床的检测需要,为防控羊水疱性疫病...
技术总结 本发明公开了用于真鳕鱼/黑鳕鱼/银鳕鱼RPA‑LFD检测的引物和探针序列,特点是根据真鳕鱼COI基因的编码序列,黑鳕鱼COI基因的编码序列,银鳕鱼COI基因的编码序列分别设计2条引物序列和1条探针序列,真鳕鱼COI基因的引物和探针序列为Gmo‑RPA‑F、Gmo‑RPA‑R和Gmo‑RPA‑P,黑鳕鱼COI基因的引物和探针...