LC-MS/MS定量分析的4个步骤 嘉峪检测网 2020-10-27 09:53 1. 准备工作 ● 查阅文献 ● 做好样品前处理,萃取浓缩分离纯化 ● 有条件的可先在HPLC上摸好LC条件,能够基本分离更好,缓冲体系符合MS要求 ● 溶剂包括水的纯度,最好色谱纯以上 ● 新的色谱柱可能要先冲洗很长时间才能干净,某些样品非常容易吸附在...
蛋白LC-MS/MS分析是将蛋白用蛋白酶酶切消化为肽段混合物，这些肽段经高效液相色谱分离，再由串联质谱进行分析鉴定。蛋白LC-MS/MS鉴定步骤：收集样本后进行总蛋白质提取→消化切割蛋白为多肽片段→高效液相色谱（HPLC）分离→分级进入质谱（MS）电场进一步离子化→MS获得各离子质荷比和峰型信息→软件计算氨基酸组成→...
一、LC-MS/MS的原理和步骤 LC-MS/MS是一种将液相色谱(LC)和串联质谱(MS/MS)相结合的分析技术。它主要包含以下几个步骤: 1.样品制备: 多肽样品通常需要经过提取、纯化和消化等步骤,以获得适合分析的样品。 2.液相色谱: 将多肽样品通过液相色谱系统进行分离,常用的分离方式包括反相色谱、离子交换色谱和亲和色谱等...
液相色谱串联质谱法(LC/MS-MS)是目前测定皮质醇浓度的最常用方法之一。 3、检测指标 4、实验步骤 1.样品制备:采集待测生物样品,如血清、尿液等,加入内标稳定同位素皮质醇,进行蛋白质沉淀或提取等样品前处理步骤。 2.液相色谱分离:将经过样品制备处理的样品进入液相色谱系统进行分离。常用的分离柱为C18反相柱。 3....
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步骤二:质谱方法建立和优化 配制标准物质溶液,直接引入质谱检测器进行质谱扫描,获取目标化合物的离子信息(可选择ESI、APCI、APPI等离子化方式和正负离子模式) 临床LC-MS/MS多为定量检测,常采用多反应监测MRM和选择性反应监测SRM模式选择定量离子对和定性离子对(满足灵敏度和特异性的条件下选择响应高、选择性和稳定性好...
按照图1所示的方法进行样品的固相萃取净化步骤,收集洗脱液待浓缩。 图1 固相萃取方法 3.3 浓缩 将固相萃取的收集瓶置于M64高通量平行浓缩仪中浓缩,按照水浴温度50℃、氮气压力1psi的条件浓缩至近干,加入0.1%甲酸水溶液250μL复溶,混匀后用微孔滤膜过滤,装于200μL内衬管中,供仪器检测。
共识第一次提出CAH筛查流程图,包括:样本采集、一级筛查、二级筛查、鉴别诊断、随访共五个步骤。CAH筛查的主要方法有ELISA、时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA) 及LC-MS/MS法等。其中,新生儿CAH一级筛查常用方法为TRFIA,二级筛查常用方法为LC-MS/MS法。同时,共识也将LC-M...
之后点击“自动启动”进行抽真空，等待小窗口中绿色进度条走完之后，真空检测的进度条恢复成原始的灰色（此过程大约需要30min），关闭CID气总阀门（使用前打开），再抽24h方可进样分析。三、调谐：（在“LC-MS操作流程及维护说明”下“ LCMS-8040的维护说明视频6”）。1. 打开氩气与氮气；2. 去掉DL管上的堵针...
LC-MS/MS是LC-MS的扩展,增加了一个串联质谱(MS/MS)步骤。在LC-MS/MS系统中,分离的样品分子首先在第一个质谱仪(MS1)中被离子化和测量,然后选择特定的离子进行碎裂,产生的碎片离子在第二个质谱仪(MS2)中被进一步分析。这个过程称为串联质谱或MS/MS。