此外,我们还采用了MS/MS二级扫描模式,选择data-dependent scans进行数据采集,进一步提高了鉴定的准确性。
其检测步骤严谨而复杂,主要包括以下几个方面: 一、样本收集与处理 1.样本收集:根据检测需求,收集适当的生物样本(如血液、尿液、组织等)或非生物样本。 2.前处理:对样本进行预处理,包括提取目标化合物、去除干扰物质等。对于生物样本,可能涉及蛋白质沉淀、萃取、净化等步骤,以确保样本适合后续分析。 二、液相色谱分离...
LC-MS的第一步是液相色谱分离,液相色谱通过固定相、移动相和梯度洗脱条件实现样品中组分的分离。 2、电离: 经过液相色谱分离后,样品溶液被引入质谱仪的电离源。电离源将样品分子转化为带电的离子。在生物分析中,常用的电离方式有电喷雾电离(ESI)和大气压化学电离(APCI)。 3、一级质谱(MS1)检测: 带电的离子进入...
蛋白LC-MS/MS分析是将蛋白用蛋白酶酶切消化为肽段混合物,这些肽段经高效液相色谱分离,再由串联质谱进行分析鉴定。蛋白LC-MS/MS鉴定步骤:收集样本后进行总蛋白质提取→消化切割蛋白为多肽片段→高效液相色谱(HPLC)分离→分级进入质谱(MS)电场进一步离子化→MS获得各离子质荷比和峰型信息→软件计算氨基酸组成→...
3、编辑批处理文 件,排列进样顺序; 4、平衡MS离子源和色谱柱; 5、LC-MS/MS采集数据。 第八步:数据处理 参考: http://www.cnreagent.com/source/syziliao_502.html https://wiki.antpedia.com/babubangningaodingyezhizhidedingliangfenxi-1468794-news...
LC-MS/MS定量分析的4个步骤 嘉峪检测网 2020-10-27 09:53 1. 准备工作 ● 查阅文献 ● 做好样品前处理,萃取浓缩分离纯化 ● 有条件的可先在HPLC上摸好LC条件,能够基本分离更好,缓冲体系符合MS要求 ● 溶剂包括水的纯度,最好色谱纯以上 ● 新的色谱柱可能要先冲洗很长时间才能干净,某些样品非常容易吸附在...
4️⃣ 分析步骤:① 首先,查看存在哪些离子,初步判断分子量,再进行PRODUCT SCAN,找出碎片信息,从中选定MRM需要测定的一对或更多离子对,为最后LC-MS/MS做准备。② 特征离子的质量色谱在复杂混合物分析及痕量分析时是LC/MS测定中最有用的谱图。当样品浓度很低时,LC的TIC上往往看不到峰。此时,根据上一步得到...
1.样品制备:采集待测生物样品,如血清、尿液等,加入内标稳定同位素皮质醇,进行蛋白质沉淀或提取等样品前处理步骤。2.液相色谱分离:将经过样品制备处理的样品进入液相色谱系统进行分离。常用的分离柱为C18反相柱。3.质谱检测:将分离后的物质通过电离源进行电离产生离子,并进入质谱系统进行质量/荷比值的分析。常用...
下面将详细介绍LC-ESI-MS/MS的检测流程。 一、样品前处理 样品前处理是LC-ESI-MS/MS检测的第一步,其目的是去除样品中的杂质,富集目标分析物,提高检测灵敏度和准确性。前处理方法因样品类型和分析目标而异,常见的方法包括沉淀、萃取、净化、富集等。例如,在生物样品分析中,常采用蛋白沉淀法去除蛋白质,再通过液液...