使用LC-MS进行组蛋白修饰检测的一般步骤 1. 样品制备:从生物样品中提取组蛋白,然后进行水解,得到组蛋白肽段。2. 肽段富集:对于某些特定的修饰(例如磷酸化),可能需要使用特定的亲和层析技术(例如IMAC或TiO2柱)来富集被修饰的肽段。3. 液相色谱分离:使用液相色谱(LC)将肽段分离。通常,逆相高效液相色谱 ...
其检测步骤严谨而复杂,主要包括以下几个方面: 一、样本收集与处理 1.样本收集:根据检测需求,收集适当的生物样本(如血液、尿液、组织等)或非生物样本。 2.前处理:对样本进行预处理,包括提取目标化合物、去除干扰物质等。对于生物样本,可能涉及蛋白质沉淀、萃取、净化等步骤,以确保样本适合后续分析。 二、液相色谱分离...
1、液相色谱分离:LC-MS的第一步是液相色谱分离,液相色谱通过固定相、移动相和梯度洗脱条件实现样品中组...
利用LC-MS检测揭示生物样品中的差异蛋白表达通常包括以下步骤:3.1样品准备:对生物样品进行蛋白质提取和消化等前处理步骤,以获得适合LC-MS分析的样品。3.2LC-MS分析:将样品注入LC-MS系统,通过液相色谱分离蛋白质,并通过质谱仪鉴定和定量差异蛋白。3.3数据分析:使用蛋白质鉴定和定量软件对LC-MS数据进行分析,...
皮质醇是一种重要的压力激素,在医学、生物学和心理学等领域具有广泛的研究价值。液相色谱串联质谱法(LC/MS-MS)是目前测定皮质醇浓度的最常用方法之一。3、检测指标 4、实验步骤 1.样品制备:采集待测生物样品,如血清、尿液等,加入内标稳定同位素皮质醇,进行蛋白质沉淀或提取等样品前处理步骤。2.液相色谱分离...
第三步:使用MS进行LC检测 虽然各种各样的检测器的不同技术和敏感性已被加上LC用于分析不同样品类型中,质谱仪已经成为一种选择性的,灵敏的和普遍的检测器。 与其他检测器不同,携带分离的分析物的LC洗脱液不允许流入质谱仪。当LC系统在环境压力下运行时,质谱仪在真空下运行...
LC-MS/MS检测12种类固醇激素的方法如下:1. 样品前处理:将生物样品(如血液、尿液)进行萃取、浓缩等步骤,去除杂质,提高检测的灵敏度和特异性。2. 色谱分离:利用高效液相色谱技术,将12种类固醇激素进行分离,以便后续的质谱检测。3. 质谱检测:采用串联质谱技术,对分离后的类固醇激素进行检测。通过多级质谱分析...
LC-MS/MS定量分析的4个步骤 嘉峪检测网 2020-10-27 09:53 1. 准备工作 ● 查阅文献 ● 做好样品前处理,萃取浓缩分离纯化 ● 有条件的可先在HPLC上摸好LC条件,能够基本分离更好,缓冲体系符合MS要求 ● 溶剂包括水的纯度,最好色谱纯以上 ● 新的色谱柱可能要先冲洗很长时间才能干净,某些样品非常容易吸附在...
一、样品前处理 样品前处理是LC-ESI-MS/MS检测的第一步,其目的是去除样品中的杂质,富集目标分析物,提高检测灵敏度和准确性。前处理方法因样品类型和分析目标而异,常见的方法包括沉淀、萃取、净化、富集等。例如,在生物样品分析中,常采用蛋白沉淀法去除蛋白质,再通过液液萃取或固相萃取富集目标分析物。 二、液相...