液质联用工作原理:首先是将样品在高效液相色谱中被离子化,按离子的质荷比(m/e或m/z)分离,然后再进入质谱检测器中检测每一个离子谱峰的分子量信息,从而实现分析目的的一种分析方法。LCMS可以对化合物分子进行定性分析及粗略的定量分析!原理过程参考动图解析16种实验室仪器(UV、IR、MS、NMR、SEM等)工作原理中的...
液相色谱-质谱(LC-MS)数据分析通常遵循以下流程: 一、数据预处理: 1.首先,对原始的LC-MS数据进行预处理,包括峰检测、峰识别和峰提取。这一步骤可以通过使用专业的数据处理软件或编程语言来完成。 2.接下来,进行信号去噪处理,以去除噪声和杂质信号,提高数据质量和分析结果的准确性。
Project,出现下图对话框,键入项目名称,点击“Add All”添加项目功能,点击OK,完成。 b. 硬件设置:激活MS 主机。 c. 进入MS 的Manual Tuning 界面,并设置注射泵流速5～10ul/min。 d.选择质谱扫描方式:Q1 Scan,设置扫描范围(应包含待分析的化合物);根据化合物性质,选择扫描极性。 e.单击start开始扫描。待喷雾平...
● 再根据上一步确定的母离子进行PRODUCT SCAN,确保所有碎片离子都来自待测化合物,而不是溶液中的杂质,找出较强的碎片离子信息。还可改变CE,从中选定MRM需要测定的一对或更多离子对,为最后LC-MS/MS联用做准备 ●做PRODUCT SCAN时,注意小数点后的位数,MRM输入要准,灵敏度才高 ● 先多选几个离子对,待出现基质...
这可以从两方面考虑,首先是在硬件条件下,因为在过去几十年中,LC-MS或者LC-MS/MS已经成为小分子样品分析的标准检测手段,作为一种混合型分析仪器,LC-MS需要满足其两个组成部分的要求,首先液相色谱部分是用来分析液态样品的,流动相从溶剂瓶中流出经过高效...
LC-MS 法定量蛋白的基本流程包括: 样品的纯化或富集、目标蛋白的酶解、最后对确定的特征性肽进行检测, 完成蛋白的定量。在这个过程当中, 与小分子的分析类似, 同样用稳定同位素标记的类似物用作内标(IS), 以提高分析的准确度[20]。 以肽为中心自下而上定量目标蛋白, 已经成为目前最广泛使用的LC-MS 分析策略。
目的是将 LC-MS 检测信号匹配到对应代谢物,分为标准品数据库比对和算法预测两种方式[5]。 4.功能分析:"万里长征" 的最后一步,把结果解析好是代谢组的点睛之笔。然而要将功能注释做得尽善尽美,通常还需要结合文献调研与后续实验来确认。不过我们可以先通过通路鉴定,GESA 分析,通路富集分析,网络分析等分析方法找到...
4.差异筛选：首先根据VIP>1，然后根据p-value<0.05筛选出有差异的代谢物,如果筛选出的差异代谢物还是...
总结来说,基于LC-MS/MS的偶联位点分析,一般流程如图3所示,下面就以典型的ADC药物分子为代表进行进一步展示。 图2 肽段在不同解离技术下的特异性解离方式[2] 图3 偶联位点分析一般流程 偶联位点的筛选及识别 以Kadcyla为例,DM1毒素分子通过SMCC连接子连接到曲妥珠单抗序列中赖氨酸残基上,形成drug-linker后会造成+...
LC-MS/MS定量分析流程与经验 第一步: Q1 SCAN——确定母离子的质荷比 ●根据待测化合物性质,选择分析的极性(+/-)、离子化方式(ESI/APCI),根据分子量选择扫描范围和时间 ●确定母离子的质荷比,准确到小数点后一位。 参数设置: 扫描方式:Q1 Scan ...