lacZ基因 lacZ基因是⼤肠杆菌中lac操纵⼦的结构基因，表达β-半乳糖苷酶，分解乳糖为半乳糖苷。β-半乳糖苷酶是由四个相同的亚基组成的，每个亚基⼜包含两个⽚断，即α⽚断和ω⽚断，只有这两种⽚断同时存在时，β-半乳糖苷酶才表现出活性。lacZ基因的变异或缺失将直接导致β-半乳糖苷酶活性缺失，...
lacz基因筛选原理：① lacz基因编码β-半乳糖苷酶，这个酶能把无色的X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）分解成半乳糖和深蓝色的5-溴-4-氯靛蓝，在基因工程实验里常被当作报告基因用于筛选含有重组质粒的细菌菌落。② 在构建载体时，通常会把目的基因插入到lacz基因内部特定的多克隆位点。如果插入成功...
lacZ、Y、A基因的转录是由lacI基因指令合成的阻遏蛋白所控制。lacI一般和结构基因相毗连，但它本身具有自己的启动子和终止子，成为独立的转录单位。由于lacI的产物是可溶性蛋白，按照理说是无需位于结构基因的附近。它是能够分散到各处或结合到分散的DNA位点上（这是典型的反式-作用调节物。）通过突变的效应是可以将...
LacZ报告基因表达会生成β-半乳糖苷酶(β-galactosidase),β-galactosidase能将X-Gal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4氯靛蓝,通过分析蓝色变化,可以对LacZ基因的表达进行定量或定性检测。酵母杂交LacZ报告基因检测的常用方法有三种,第三种方法是定量检测,三种方法的适用范围如下。 方法一:β-半乳糖苷酶培养基显色法...
但当含有lac启动子的质粒中插入了外源基因,则不能产生β-半乳糖苷酶,因此不能分解X-gal产生蓝色底物,所在的菌落呈现白色(相对蓝色),这样的菌落才有可能是我们想要的菌株(因为有外源基因)。蓝白斑筛选减轻了在筛选阳性克隆菌落时的工作...
Lacz报告基因是一种外源基因,其编码了β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)酶。β-半乳糖苷酶能够催化半乳糖苷键的水解,将底物X-gal(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactopyranoside)分解为带有蓝色染色的产物。因此,当Lacz报告基因的表达受到调控时,可以通过检测染色产物的形成来判断基因的活性。
LacZ基因是动物细胞内重要的 reporter基因,其产物是β-半乳糖苷酶,其底物为半乳糖苷,当把此底物标记上荧光基团后,即成为底物荧光探针 [1] 。LacZ基因广泛用于基因表达调控研究中的一种基因。例如,基因克隆中常用的质粒载体PUC 19及噬菌体载体M13系列均带有LacZ基因。
基因LacZ的读音组合起来就是：“lack Z Y A”。在遗传学和分子生物学领域，这种读音方式有助于研究人员快速记忆和交流。例如，在讨论LacZ基因时，科学家们可以迅速准确地传达信息，而无需花时间详细解释。值得注意的是，LacZ基因是一种β-半乳糖苷酶基因，在乳糖代谢和诱导表达研究中扮演重要角色。它...
一般阳性克隆在0.5～8h内会变蓝,超过8h容易产生假阳性结果。 二、实验结果 AH109和NMY51的LacZ基因都是胞内表达,物理破碎法使酵母细胞内的β-半乳糖苷酶释放出来,才能将X-Gal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4氯靛蓝,常用滤纸印记法检测结果。 NMY51酵母双杂(滤纸影印显色)...