JC-1 形成带有红色荧光的聚集体(在健康的线粒体中)。 随着膜电位的降低,JC-1 变成单体,呈绿色荧光。 红绿荧光比例的变化被用作线粒体状况的指标。 JC-1线粒体膜电位荧光探针染色步骤(流式细胞仪法): 1. 于6-,12或24-孔板上进行细胞铺板,密度为5×105 cells/mL。37℃,5% CO2培养箱培养过夜。选择合适...
JC-1是一种荧光亲脂性羰花青染料,用于测量线粒体膜电位。 线粒体膜电位较高时, JC-1 在基质中汇聚形成聚合物 (J-aggregates),可以产生红色荧光 (Ex/Em=585/590 nm);线粒体膜电位较低时,JC-1 不能聚集在线粒体基质中,以单体形式存在产生绿色荧光 (Ex/Em=510/527 nm)。这样就可以非常方便地通过荧光...
(5)用JC-1染色缓冲液(1×)洗涤2次:加入1mL JC-1染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入1mL JC-1染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4分钟, 沉淀细胞,弃上清。(6)再用适量JC-1染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察...
当在490nm处激发时,JC-1发生从绿色到橙绿色的可逆改变,因为线粒体膜极化的更大。这两种颜色都可以被流式细胞仪上装好的一般滤光器检测到,因此绿色发射光可以通过荧光通道1(FL1)进行分析,橙绿色发射光可以通过荧光通道2(FL2)进行分析。JC-1主要的优点是,它既可以进行定性检测,通过其发射荧光的颜色从绿...
它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。线粒体跨膜电位的存在,使一些亲脂性阳离子荧光染料如 Rhodamine 123、JC-1、JC-10等可结合到线粒体基质,其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。
在JC-1染色分析中,X轴(FL1-H)通常表示绿色荧光强度,Y轴(FL2-H)通常表示红色荧光强度。根据图...
掌握JC-1实验的每一步至关重要。首先,我们需要配制精确的JC-1染色工作液,为细胞提供所需的荧光环境。在阳性对照中,通过加入CCCP观察线粒体膜电位的丧失,为实验提供标准。悬浮细胞的操作流程包括细胞悬液的制备、染色、离心洗涤以及荧光观察,每一个环节都需要细心处理,以确保结果的准确性。注意事项,...
阳性对照组cccp(50um 1h,100um 1h,50um 10min),jc-1溶解后,2.5ug/ml 染色15min,染色结果 ctrl组绿光弱,红光也弱,阳性对照组绿光强、红光也强,并不如说明书说的 阳性对照组处理后 红光弱,绿光强,重复好几次了😒,想请教一下大家这是什么原因呢?
流式细胞分析的参考方案 JC-1 染色试剂可用作多种样本包括肌细胞、神经元细胞)以及完整组织和离体线粒体的线粒体电位的指示剂。 绿色与红色荧光的比例仅取决于线粒体膜电位,与线粒体大小、形状和密度等可能影响荧...