f. 再用 500 μL 的 PBS 重悬细胞,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计或流式细胞仪分析 (绿色荧光:Ex/Em=510/527 nm;红色荧光:Ex/Em=585/590 nm)。 2) 贴壁细胞: 注:若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞,可先对贴壁细胞进行消化、收集,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。若用荧光
检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm，发射光设置为530nm；检测JC-1聚合物时，可以把激发光设置为525nm，发射光设置为590nm。4.选择视野 通常选择3-5个视野进行观察，以确保结果的代表性。每个视野应尽量均匀分布细胞，避免选择细胞过于密集或稀疏的区域。5.定量统计分析 图像采集：使用荧光显微镜拍...
6、配制JC-1染色缓冲液(1×):将JC-1染色缓冲液(5×)用PBS稀释至1×,并置于冰上。 7、洗涤:孵育结束后,弃去上清,用JC-1染色缓冲液(1×)洗涤2-3次后,加入2mL PBS或培养基(可含血清)。 8、观察拍照:荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。激发波长通常为488nm,发射波长为红色荧光590nm,绿色荧光530nm。细...
JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电△Ψm位的理想荧光探针。JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-1只能...
JC-1线粒体膜电位荧光探针染色步骤(流式细胞仪法): 1. 于6-,12或24-孔板上进行细胞铺板,密度为5×105 cells/mL。37℃,5% CO2培养箱培养过夜。选择合适的化合物根据特定的步骤进行凋亡诱导。 注:进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过1×106 cells/mL,也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。
在活细胞中，JC-1在去极化膜电位下以绿色荧光单体形式存在，或在超极化膜电位下以橙色荧光J聚集体形式存在。然后用50nM FCCP（一种原生细胞）处理细胞，使线粒体膜去极化。加入解耦器后约10分钟，将电池照亮488nm，并在515-545nm和575-625nm之间收集发射。JC-10（货号：HCQ000588FY）JC-10 是 JC-1 的优越...
JC-1 (JC-1, Mitochondrial membrane potential dye；3520-43-2)是荧光亲脂性羰花青染料，主要应用于测量线粒体膜电位。荧光 : λex 514 nm, λem 531 nm in methanol。JC-1染色原理 JC-1在通过流式细胞术检测线粒体膜电位中广泛使用。JC-1能够选择性的进入线粒体中，并且由于膜电位的增加（大约超过80-...
【用荧光酶标仪进行JC-1检测】：[1].用测试化合物细胞培养所需的一段时间以诱导细胞凋亡。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。[2].将100μL/孔的96孔板或25μL/孔的384孔板的JC-1工作溶液加入到细胞板中。[3].将JC-1加载在37℃，5％CO2培养箱中培养15-60分钟。[4].从平板...
2) 如果JC-1进入细胞的效果不好,可向工作也液中加入适量20% Pluronic F127溶液,终浓度为0.02-0.05%,Pluronic F127可以防止JC-1在缓冲液中聚合并帮助其进入细胞。 以上方法仅供参考。 五、更多试剂 DiOC6(3)内质网荧光探针 DiOC6(3)内质网荧光探针
JC-1有单体和多聚体两种存在状态,在低浓度时以单体的形式存在,高浓度时以多聚体形式存在,两者的发射光谱不同,但均可在流式细胞仪绿色(FL-1)通道检测出绿色荧光,JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,…