f. 再用 500 μL 的 PBS 重悬细胞,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计或流式细胞仪分析 (绿色荧光:Ex/Em=510/527 nm;红色荧光:Ex/Em=585/590 nm)。 2) 贴壁细胞: 注:若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞,可先对贴壁细胞进行消化、收集,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
6、配制JC-1染色缓冲液(1×):将JC-1染色缓冲液(5×)用PBS稀释至1×,并置于冰上。7、洗涤:孵育结束后,弃去上清,用JC-1染色缓冲液(1×)洗涤2-3次后,加入2mL PBS或培养基(可含血清)。8、观察拍照:荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。激发波长通常为488nm,发射波长为红色荧光590nm,绿色荧光530nm...
荧光 :λex 510 nm, λem 525 nm。 jc-1和jc-10使用对比 图3.用JC-10™和JC-1在Jurkat细胞中测量Campothecin诱导的线粒体膜电位变化。用喜树碱(10μM)处理Jurkat细胞4小时后,将JC-1和JC-10染料负载溶液加入孔中并孵育30™分钟。使用 NOVOstar酶标仪(BMG Labtech) 在 Ex/Em = 490/525 nm 和 ...
【预期用途】用于精子线粒体染色。【染色原理】通过JC-1染料荧光颜色的变化来评估精子线粒体膜电位的状态。当精子线粒体膜电位较高时,JC-1荧光探针聚集在线粒体中形成聚合体,经488nm激光激发呈红色荧光(发射波长585/590 nm);当精子线粒体膜电位较低时,JC-1荧光探针在
JC-1膜电位荧光探针,染色步骤。JC-1 (JC-1, Mitochondrial membrane potential dye;3520-43-2)是荧光亲脂性羰花青 线粒体膜电位荧光探针,主要应用于测量线粒体膜电位。荧光 : λex - 范德生物于20220926发布在抖音,已经收获了12个喜欢,来抖音,记录美好生活!
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变,可以很容易地检测到线粒体膜电位的下降,从而作为细胞凋亡早期的一个检测指标。流式细胞分析是JC-1常用的检测方法之一,通过分析红色和绿色荧光的相对比例,可以定量地检测线粒体去极化的比例,进而评估细胞凋亡的程度。
1)-7)同上JC-1染色步骤(流式细胞仪); 9)用300 μL缓冲液重悬细胞;然后按照每孔100 μL的量将染色好的细胞转移到黑色的96孔板内,即可进行荧光酶标板分析。注意:请马上进行荧光显微分析,此细节重要。 数据分析:健康细胞内,JC-1单体聚集形成聚合物,线粒体呈现强烈的红色荧光(激发波长550 nm, 发射波长600 nm...
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 培养操作步骤: 1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; ...
JC-1能够选择性地进入线粒体,其荧光特性会随着线粒体膜电位的变化而变化:膜电位状态:在线粒体膜电位较高时,JC-1会聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,并发出红色荧光。低膜电位状态:在线粒体膜电位较低时,JC-1无法聚集在线粒体基质中,以单体形式存在,并发出绿色荧光 流式细胞分析:通过分析红色和...